茜素石墨烯-壳聚糖修饰玻碳电极应用于人类端粒DNA的测定.pdfVIP

第41卷 分析化学(FENXIHuAXUE)研究报告 第4期 ChiIleseJo啪alof 481～487 2013年4月 Analytical Chemisny 茜素／石墨烯-壳聚糖修饰玻碳电极 应用于人类端粒DNA的测定 蒋园园 王坤 许崇正 杨小弟4 李卉卉+ (江苏省生物功能材料重点实验室，江苏省薪型动力电池重点实验室，南京师范大学化学与材料科学学院，南京2l0097) 摘要采用茜素(AR)掺杂石墨烯(CRG)、壳聚糖(cs)制备了AR／cRG—cs电极。该修饰电极在pH7．4的 V。通过循环伏 PBS中出现了一对可逆的氧化还原峰，阳极峰的峰电位为_0．573V，阴极峰峰电位为_0．652 s～。基于 安法(cV)证明AR在电极上发生了两电子两质子的氧化还原可逆过程，电子传递速率K。为1．69 AR与人类端粒DNA相互作用导致的AR峰电流减弱及式量电位(∥)负移的电化学信号，建立了一种灵敏 简便、重现性好、稳定性好的测定人类端粒DNA的电化学方法，线性响应范围为8×10“一1．4×10。moL／L 关键词茜素；端粒DNA；相互作用；修饰电极；电化学检测 1 引 言 DNA是生物的基本遗传物质，而端粒DNA是真核生物线状染色体末端的DNA重复序列，在保持 染色体的完整性和维持细胞的复制能力方面起着重要作用。端粒酶则是由RNA和蛋白质亚基组成的， 能够延长端粒的一种特殊的反转录酶。端粒结合蛋白可以通过调节端粒酶的活性来调节端粒长度，进 而控制细胞的衰老、永生化和癌变。1，2J。临床实验证明，85％的肿瘤发病率与端粒酶的正常表达有密切 关系日J。在生物学研究领域，端粒DNA和端粒酶一直是被作为研究抗肿瘤药物新靶向。 茜素(AR)是从茜草中提取的一种蒽醌衍生物，这种红色染料是自然界中广泛存在的一类光敏剂， 也是多种抗癌药物的重要组成部分。4j。现代医学证明，AR可有效地治疗慢性支气管炎。AR具有氧化 还原性质，目前的研究表明，此类药物通常以DNA为作用靶点，在可见光照射条件下对DNA产生损伤， 表现出光敏抗癌的功效。5’6j。因此，研究AR与人类端粒DNA间的相互作用卅。对于解析蒽醌类化合 物的DNA识别机理，以及通过分子设计寻找有效的治疗癌症的药物先导物都具有重要的意义。本研究 采用还原石墨烯(cRG)的优良的催化和导电性能，制备了茜素掺杂石墨烯一壳聚糖(cs)修饰玻碳(Gc) 电极，并应用于对人类端粒重复序列DNA(5’一r兀’AGGGr兀’AGGG一3’)的定量测定。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 seven 85—1型磁力搅拌器(南京科尔仪器设备有限公司)；HH_2型数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)； KQ—100型超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)。 CRG分散液(O．5g／L，南京先丰纳米材料科技有限公司)；茜素(maddinCheIIlistryCo，ltd)；壳聚糖 7—1TrAGGG，rI’AGGG一3’)， (南京奥多福尼生物科技有限公司)；特殊序列的单链端粒DNA片段：ss。(5 ss，(5 2．2实验方法 2．2．1 moL／L 人类端粒双链DNA溶液和缓冲液将两条单链DNA的0．5 Tris—Hcl缓冲溶液(pH7．4) 2012m9．22收稿；2012．11—30接受 工程资助项目 }E—mail：yan铲iaodi@njnu．edu．cn；huihuili@njnu．edu．cn 482 分析化学 第4