氯粘康酸环异构酶基因克隆及序列研究3.pdfVIP

第 13 卷 第 3 期 中 国 生 态 农 业 学 报 Vol . 13 　No . 3 2 0 0 5 年 7 月 Chinese Journal of EcoAgricult ure J uly , 　2 0 0 5 氯粘康酸环异构酶基因克隆及序列研究 钟文辉 　　　　　　　　　　何国庆 (南京师范大学化学与环境科学学院　南京　2 10097) (浙江大学生物系统工程与食品科学学院　杭州 　310029) 孙 　明　喻子牛 　　　　　　　冯孝善 (华中农业大学生命科学技术学院　武汉 　430070) (浙江大学环境与资源学院　杭州 　3 10029) 摘 　要 　研究从土壤中分离出 1 株降解 2 ,4 二氯酚能力较强的假单胞菌菌株“GT24 1 1”,并从中克隆出参与降解 ( ) ,该基因编码的氯粘康酸环异构酶可将 2 ,4 2 ,4 二氯酚的氯粘康酸环异构酶基因 dcp C 二氯 顺 ,顺 粘康酸转化为 反式 2 氯 双烯内酯 。采用的基因克隆策略是用 Sout hern 杂交对其邻近基因进行定位后构建基因组文库 ,再用斑 点杂交从基因文库中筛选 目的转化子 。经序列测定得知 dcp C 基因编码区 1110bp ,且核苷酸和推测的编码氨基酸 序列分析表明 dcp C 属氯粘康酸环异构酶基因家族 ,并与该基因家族的其他基因有一定差异 。 关键词 　假单胞菌 　2 ,4 二氯酚 　氯粘康酸环异构酶基因　基因克隆 ( Cloning and sequence analysis of chloromuconate cycloisomerase gene. ZHON G Wen Hui College of Chemistry and Envi ) ( ronmental Science , Nanjing Normal University ,Nanjing 2 10097 ,China ,HE Guo Qing College of Biosystem Engineering ) ( and Food Sciences , Zhejiang University , Hangzhou 3 10029 ,China , SUN Ming , YU Zi Niu College of Life Science and ) ( Technology ,Huazhong Agricultural University ,Wuhan 430070 ,China , F EN G Xiao Shan College of Environmental and Resource Sciences ,Zhejiang University ,Hangzhou 3 10029 ,China) , CJ EA , 2005 ,13 (3) :112～115 Abstract 　A 2 ,4 dichlorop henol degrading Pseudom onas strain GT24 1 1 was isolated