骨髓间质干细胞在股骨头缺血性坏死修复中的研究及应.docVIP

　　骨髓间质干细胞在股骨头缺血性坏死修复中的研究及应 【关键词】 股骨头缺血性坏死 股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head，ANFH)为进展性的髋关节病变，严重影响了患者的生活质量。目前临床上多采用手术治疗，但手术创伤大、费用高，常造成治疗的障碍，因此新型、有效、微创的治疗方法是今后的趋势。骨髓间质干细胞(bone marroesenchymal stem cells，BMSCs)具有强大的自我增殖和多向分化潜能，可通过诱导向成骨方向分化，这种可在体外控制性培养并能在体内外向成骨分化的特性，为骨缺损的修复再生开辟了新途径，也给ANFH的治疗带来了新的突破。本文就BMSCs治疗ANFH的研究和应用进展作以概述。 1 骨髓间质干细胞的生物学特性 BMSCs具有干细胞的共同特性，能够自我增殖并具有多向分化潜能［1］。研究显示在体外培养中BMSCs每传代一次，细胞数增加约2.2倍，且在体外分裂38次以上仍保持干细胞多项分化潜能，BMSCs中约有20％处于静止期(G0期)，即足以维持增殖分化所需的细胞供给，且在经体外传代20～25代后，细胞形态、生长曲线、免疫表型仍无明显变化，在多代培养后仍能保持染色体核型和端粒酶活性不变［2］，具有多向分化潜能是BMSCs的另外一个特征。对细胞周期的研究显示，只有少数BMSCs正在活跃地复制(约10％处于S+G2+M期)，而大多数细胞处于G0／G1期，高比例的G0／G1期细胞暗示着BMSCs具有高度分化潜能，在特定的理化条件与细胞因子诱导下，可以分化为中胚层的成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞等，也可跨越胚层的界限，向外胚层的神经元样细胞、神经胶质细胞及内胚层的肝细胞分化。 2 骨髓间质干细胞治疗股骨头坏死的实验基础 2.1 骨髓间质干细胞的成骨诱导分化 BMSCs成骨分化潜能早在20世纪五六十年代已提出，但在当时还没有从骨髓中分离出MSCs进行体外培养以产生不同类型的细胞和组织。直到1999年，Pittenger从人的髂骨骨髓中分离得到了BMSCs，其成骨分化潜能才进一步得以证实。经研究表明BMSCs为条件成骨细胞，地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C是其向成骨细胞分化和体外成骨的必要条件［3～5］。地塞米松在成骨分化早期以促进基质合成为主，后期以促进钙化为主；维生素C的作用主要是促进体外培养细胞合成胶原并调节碱性磷酸酶活性，而碱性磷酸酶是成熟成骨细胞的标志酶，也是评价机体成骨活性和组织分化能力的特异性指标，其活性的高低与成骨细胞分化呈正相关，且在体外钙化中起决定性作用；β-甘油磷酸钠可以提供骨组织在体外培养体系中发生沉淀所需的磷离子，加速结节钙化；除此之外，1，25-(OH)2维生素D3、骨形态发生蛋白(BMP)及TGF-β等也可诱导BMSCs向成骨分化［6、7］。但这些诱导剂发挥作用的机制、诱导剂间的相互作用、最佳量效比和序贯应用等问题尚未完全明确，有待进一步研究。 2.2 骨髓间质干细胞修复骨缺损 基于BMSCs体外培养可以分化为成骨细胞的实验基础，人们开始利用体外扩增的BMSCs植入体内修复骨组织的缺损。BMSCs修复骨组织缺损关键是尽可能快地将足够多的细胞输送到缺损部位，以便迅速形成相当大小的间充质胚基而实现缺损修复。直接注射细胞是一种方法，但细胞往往定位不好，容易流失，难以在骨缺损部位较长时间维持一定数量。目前使用较多的是用体外培养扩增后的BMSCs与支架材料制备成细胞-材料复合体，然后再移植到创伤缺损部位，进行组织修复，在多种动物实验中均显示出较好的效果［8、9］。Livingston等［10］将培养扩增后的BMSCs与支架材料复合用于犬骨缺损修复，8周后植入物几乎每个孔中都含相当量的新骨，而且受体骨与植入物的界面上也有大量新骨生成，形成跨缺损区的一个骨连续带，16周后骨缺损逐渐修复。Kenh等［11］的羊骨缺损修复实验也进一步证实了这一点，且在这些实验动物体内未有抗体生成，未发生排异反应，为BMSCs同种异体移植治疗疾病奠定了实验基础。近年来国内祝联等［12］应用珊瑚及BMSCs复合物修复骨缺损，术后4个月骨缺损处充填了大量新生骨组织，色泽红润，8个月时色泽变白、质地坚硬、股骨无短缩，也充分证明了BMSCs修复骨缺损的能力。BMSCs的成骨分化潜能及修复骨缺损的能力无疑将大大推动ANFH治疗的进展。 3 骨髓间质干细胞治疗股骨头坏死的应用 3.1 骨髓间质干细胞治疗股骨头坏死的适应证 BMSCs治疗ANFH应严格掌握适应证。研究表明ANFH早期病程长，在进展至退行性髋关节病变晚期的3～5年间是可以逆转的，因此BMSCs治疗ANFH一般选择病变早期患者。早期病例指股骨头具有完好外形，根据ARCO(associ