大鼠实验性视网膜脱离复位模型的建立及其形态学观察.pdfVIP

潍坊医学院学报 2012年 第 34卷 第 2期 117 视网膜结构清晰，各层细胞间排列整齐，色素上皮细胞 1 材料和方法 与神经上皮细胞连接紧密，形态正常，未见变性。光感 1．1 实验动物 健康无眼疾 Sprague—Dawley(SD)大 受器细胞 内外节排列整齐，形态规则。外核层细胞数 鼠30只，雌雄各半，体重 180～220g。实验动物 由解 目多，约 10余层，胞核小数量多，内核层细胞胞核大， 放军第八十九医院提供 。 约4—6层 ，神经节细胞胞核大，排列整齐。RD后 1d： 1．2 实验方法 视网膜各层水肿明显，视网膜色素上皮层与神经上皮 1．2．1 动物分组 左眼为模型眼，右眼为正常对照。 层分离，光感受器细胞外节丢失，明显变薄，形态不规 根据术后观察时间将实验组分为3组，各 l0只，分别 则，内外核层水肿，排列紊乱 ，但细胞数 目改变不明显， 于术后 1d，1周，3周取眼球。正常对照组在实验结束 外核层出现空泡样变。RD后 1周：视网膜各层水肿 时取右眼。 减轻，仍有空泡样变，光感受器内外节部分丢失，排列 1．2．2 视网膜脱离模型的制作 术前生理盐水清洗 紊乱，外核层细胞数 目显著减少，排列更稀疏紊乱，厚 结膜囊，10％水合氯醛 以0．3ml／100g剂量行腹腔注射 度 明显变薄，内核层细胞排列紊乱，数量未见明显减 麻醉大 鼠，5mg／L托吡卡胺眼水 3次点眼散瞳，散瞳后 少，部分神经节细胞水肿，神经纤维层有空泡样变。 表麻药点眼。常规消毒铺 巾，鼻侧角膜缘处前房穿刺 RD后 3周：视网膜结构清晰，排列 比较整齐。光感受 放出房水以降眼压，剪开鼻侧球结膜，向后分离筋膜暴 器 内外节仍有消失，结构不完整，内外核层结构仍较紊 露赤道部巩膜。于角膜缘后2ram处行巩膜板层切 口， 乱，细胞数 目少，神经纤维层有空泡样变。 将一次性胰岛素注射器 BD针头沿切 口斜形插入，缓 3 讨论 慢进针，观察到视网膜与巩膜分离，进入视网膜下腔， 将针头缓慢后退，推动注射器，向内注入 1％Healon 视网膜脱离动物模型的制作是设法使视网膜色素 (上海其胜生物制剂有限公司提供)少许，局部视网膜 上皮与神经上皮分离，国内外学者均做过很多研究。 隆起呈灰 白色，表面血管清晰，约 占整个视网膜 的2／ 目前普遍采用的是Anderson的猫视网膜脱离模型 ， 3，退出针头。铺平筋膜和球结膜，10-0线间断缝合球 通过切割玻璃体，手术显微镜直视下制造视网膜裂孔， 结膜 2针，球结膜下注射庆大霉素注射液，结膜囊内涂 将透 明质酸钠注入视网膜下，该方法精确，可长久造成 红霉素眼膏，术后3d氯霉素眼水点眼，3次／d。术后 RD，但手术复杂且器械 昂贵，很难在基层实验室中开 每 日瞳孔直视下及角膜前置镜下观察眼底。 展。也有采用药物液化和机械液化的方法 J，透明质 1．3 取材及处理 分别于术后 1d，1周，3周过量麻 酸酶液化玻璃体，高速冲击视网膜造成裂孔及网脱 ，该 醉法处死动物，摘除眼球后迅速放入 4％甲醛溶液 中 方法对眼内损伤较大，手术可控性较差。大鼠眼球小， 固定24h，去除角膜、虹膜及晶状体，梯度酒精脱水，二 晶状体大呈球形 ，玻璃体相对容积较小，手术操作困 甲苯透明，浸蜡、包埋、切片。切片厚度 5m，脱蜡至 难。本研究采用外路法 J，通过巩膜、脉络膜，直接将 水，HE染色，二 甲苯固定后 中性树胶封片，光镜下观 透明质酸钠注入视网膜下 ，