腺病毒-腺相关病毒嵌合载体的研发趋势.pdfVIP

第29卷 第2期 华 侨 大 学 学 报 (自然科 学 版 ) Vo1．29 No．2 2008年 4月 Journal of Huaqiao University(Natural Science) Apr．2008 文章编号： 1000—5013(2008)02—0172—05 腺病毒一腺相关病毒嵌合载体的研发趋势 舒静波 ，刁 勇 ，肖卫东 ，曾棠埭。，许瑞安 (1．华侨大学材料科学与工程学院．福建 泉州362021； 2．滨州大学 医学院，美国宾夕法尼亚州；3．泉州医学高等专科学校，福建泉州 362011) 摘要： 分析腺病毒一腺相关病毒(Ad／AAV)嵌合载体母体中，3代Ad载体及AAV载体所具有的优势和存 在的缺点．阐述Ad／AAV嵌合载体的制备方法、生产工艺，以及其在稳定转染造血干细胞、Duchenne型肌营 养不良症(DMD)的基因治疗和人内啡肽基因的表达研究等方面的最新研究进展．同时指出，Ad／AAV嵌合 载体是近年发展起来的嵌合病毒载体，它融合了Ad和AAV两种常用的病毒载体的优点，理论上接近理想临 床应用的载体，但还需要通过大量的，特别是动物体内的应用研究去检验其优越性，以满足临床治疗需要． 关键词： 载体系统；腺病毒；腺相关病毒；嵌合；临床治疗 中图分类号： Q 782 文献标识码： A 应用基因治疗技术对X一连锁重度联合免疫缺陷综合征(SCID X1) 和血友病B患者的治疗取得 初步成功㈨，用ADA基因治疗严重免疫综合缺乏症(SCID—ADA)也取得阳性结果 ，增强了人们对基 因治疗的信心．但随后有关受试者发生肿瘤的报告，再次给基因治疗的前途罩上了阴影 ．特别是一致 被认为是最安全的腺相关病毒(AAV)载体，也有在受试者精子细胞内检出AAV基因组．这都迫使研 究者要重新加强基因治疗载体的基础研究，特别是反复检视载体的安全性问题． 1 背景 在基因治疗的发展之初，有学者提出了如下3个需要解决的基础问题．(1)安全而有效的基因载体 系统．(2)转基因表达要持久．(3)宿主免疫反应．后两个问题对短期基因治疗(如肿瘤和疫苗)并不是 限制性因素，但对于大多数的基因治疗，需要持久表达目的基因；而安全有效的基因载体系统，一直是基 因治疗研究人员梦寐以求的目标． 目前的基因治疗方案大部分采用病毒载体，最常见的病毒载体包括逆转录病毒(Retrovirus，RV) 载体、慢病毒(Lentivirus，LV)载体、腺病毒载体和腺相关病毒载体．各病毒载体都具有各自的特点，因 而适用于不同的治疗目的，如表1所示． 表1 4种常用基因治疗病毒载体的特点 Tab．1 Four well—known gene therapy of viral vectors characteristics 从表1各病毒载体的特点可看出，单一载体总存在这样或那样的缺点，限制了其广泛的应用．如果 应用现代分子生物学技术将丽种或者两种以上的病毒载体结构组合起来，可得到一种兼容各自优点的 收稿日期： 2007—07—10 作者简介： 舒静波(1982一)，男；通讯作者：许瑞安(1948一)．男，教授，主要从事分子药物学的研究．E-mail：ruianxu@ hqu．edu。cn． 第 2期 舒静波，等：腺病毒一腺相关病毒嵌合载体的研发趋势 173 新型病毒载体，理应比单个病毒载体更有优势． 嵌合病毒的制备对病毒学家来说并不是一个新课题，他们早就利用嵌合病毒技术作为病毒研究的 工具 ．基因治疗用嵌合病毒载体，主要是为了增加宿主范围，扩大转基因容量和生产滴度、组合基因元 件以延长转基因表达时间等．Ad载体的大容量与AAV载体的高安全性和转基因持续表达的特点如能 得到有效结合，从理论上讲应是极佳的组合．Fisher等 最早报道了Ad／AAV嵌合载体的开发和应用， 开辟了病毒载体的崭新研究领域． 2 Ad／AAV嵌合载体的母体 2．1 Ad载体 从结构上区分，Ad载体可以分为3代．第1代Ad载体仅去除了腺病毒基因组中的E1基因．目前 已有很多研究报道了第1代Ad