棉花细胞的研究进展.docVIP

棉花细胞质雄性不育研究进展棉花是优质纤维、食用油和蛋白集一身的重要经济作物。如何提高棉花品种的产量、品质和抗逆性并使其广泛应用于生产是当前棉花育种亟需解决的问题。杂种优势的利用则为这一问题的解决提供了新的思路,并已在很多植物中得到了广泛的应用。棉花具有十分明显的杂种优势,但目前棉花杂种优势的利用则主要采用人工去雄授粉法和核不育系“一系两用”法,方法繁琐且制种成本高,难以大规模推广应用。而水稻、高粱等作物则主要采用细胞质雄性不育性(Cytoplasmic Male Sterility,CMS)实现“三系”配套来大面积利用杂种优势的,操作简便且制种成本低。尽管棉花CMS已实现“三系”配套,但由于其恢复源狭窄及不育胞质对杂种1代皮棉产量所产生的负效应,“三系”杂种棉选育进展缓慢。随着转谷胱甘肽S-转移酶基因(gst)强恢复系“浙大强恢”的育成以及海岛棉中育性增强基因的发现,利用“三系”配套进行棉花大面积的杂种优势利用成为可能[1]。笔者从细胞学、生理生化、分子生物学和育性恢复4个方面综述棉花CMS的研究进展,并对目前状况进行了展望。 　　 　　1棉花CMS的细胞学研究 　　 　　植物雄性不育小孢子的败育时期各异,从花粉母细胞(Pollen Mother Cells,PMCs)的形成到双核花粉粒各个时期都有雄性不育发生的可能,且持续时间比较长,不限于某一特定的时间。对于棉花CMS来说,小孢子败育时期的发生主要有3种情况:主要集中发生于造孢细胞增殖时期。Murthi等[2]对哈克尼西棉CMS进行细胞学研究的结果表明不育系的雄性败育大多数发生在造孢细胞增殖期,偶尔能形成PMCs,但在减数分裂的前期就退化,因此导致雄性不育。而Thomber等[3]在美洲棉CMS系、黄晋玲等[4]在晋A不育系也发现同样的败育情况。主要集中发生于减数分裂时期。如王学德等[5]发现104-7A、湘远4-A、NM-2A和NM-3A的小孢子母细胞在造孢细胞增殖时期较少异常,但在减数分裂时期特别是减数分裂第1次分裂时期(Meiosis )却大量败育,从而在花药内见不到四分体的形成。败育时期贯穿造孢细胞增殖至减数分裂时期。童旭宏等[6]发现来源于陆地棉新型CMS的败育时期主要发生在造孢细胞增殖时期至小孢子母细胞减数分裂前的时期。 　　目前国内外大多数学者认为棉花胞质不育系花药绒毡层的过早退化或推迟解体与造孢细胞和PMCs的败育密切相关。通过细胞学观察,棉花CMS小孢子败育过程中主要出现的细胞形态特征为:造孢组织异常。如哈克尼西棉CMS系的造孢组织在发育成熟前就已解体[2]。细胞质和线粒体异常。如晋A不育系的大量小孢子母细胞在造孢细胞增殖期,细胞质大量液泡化,留下网状残体;线粒体处于解体状态,线粒体膜和内部结构模糊,基质呈半透明甚至透明状态,内嵴紊乱[4]。细胞核异常。如NM 21A的小孢子母细胞在减数分裂期,核仁穿壁频繁,出现2~3个微核多核细胞[5]。细胞形状异常。小孢子母细胞呈半月形和网状形,且连成巨型团块[5]。染色体异常。在中期出现落后染色体单体,在后期I染色体不是集中于两极,而是凝结成若干个大小不一的团块散布于两极[5]。绒毡层过早退化或推迟解体。如晋A不育系的绒毡层细胞在造孢细胞增殖期就过早退化[6]。2棉花CMS的生理生化研究 　　 　　正常的生理生化代谢是植物生长发育所需能量的基础,而研究育性表达过程中的生理生化代谢对雄性不育的生化机理探讨具有重要的意义。目前已有许多学者对棉花CMS的一些生理生化指标进行了大量的研究,取得了显著成果。在碳水化合物方面,王学德[7]通过对中棉所12A及其保持系中棉所12B的花药进行研究发现,从造孢细胞增殖期开始,保持系可育花药随着发育可溶性糖含量逐渐下降,淀粉积累逐渐增多,特别在PMCs减数分裂后,小孢子发育至花粉成熟过程中有大量淀粉合成;相反,不育花药中的淀粉和可溶性糖含量,从造孢细胞增殖时期起一直处于原来水平几乎不变。可见,缺乏淀粉积累是引起花药不育的重要原因。在氨基酸方面,Servella等[8]首次报道了亚洲棉CMS花药中酸性氨基酸含量较低;在氨基酸组分中,不育系叶片中天门冬氨酸和精氨酸含量较高,而保持系叶片中含量很少或完全缺失。随后王学德等[9]也在棉花不同CMS研究中发现了同样的情况。这说明氨基酸含量异常导致蛋白质合成受阻,从而引起花药不育。在酶方面,黄晋玲等[10]研究发现晋A不育系及其保持系的过氧化物酶同工酶和细胞色素氧化酶同工酶存在明显的差异,这种差异产生的时期与其细胞形态学观察到的小孢子败育时期一致。这说明雄性不育基因调控了同工酶的形成与差异。在激素方面,解海岩等[11]用酶联免疫检测技术对哈克尼西棉CMS、保持系、恢复系和杂种F1在花药发育时期内源激素含量的动态变化进行研究,发现在保持系