羟基脲增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导的K562细胞凋亡及其分子机制.pdfVIP

中 国 医 学 科 学 院学 报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE · 论 著 · 羟基脲增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 诱导的 K562细胞凋亡及其分子机制 武瑶珉，张亚玺，史 娟，刘士廉，刘彦信，郑德先 中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京 100005 通信作者：郑德先 电话 ：010电子邮件 ：zhengdx@pumc．edu．CN 摘要：目的 研究化疗药物羟基脲 (HU)增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的K562细胞凋亡 及其分子机制。方法 用重组可溶性TRAIL (rsTRAIL)处理慢性髓细胞性白血病来源的K562和SVT一35细胞，采用四 唑氮盐／吩嗪硫酸甲酯比色法测定细胞生长抑制率，检测细胞对rsTRAIL的敏感性；化疗药物HU与rsTRAIL联合作用于 对rsTRAIL不敏感的K562细胞，用四唑氮盐／吩嗪硫酸甲酯染色法检测细胞敏感性的变化；Westernblot分析凋亡相关 蛋白激酶的活化水平，以及凋亡抑制蛋白细胞型Fas相关死亡区域蛋白样 白介素-1B转换酶抑制蛋白 (c—FLIP)和细胞 凋亡抑制蛋白1(c—IAP1)的表达。结果 用 1 g／ml的rsTRAIL处理SVT一35细胞，其存活率达32％，而同样条件下 K562细胞的存活率达93％；化疗药物HU和rsTRAIL联合处理K562细胞，与两者单独作用相比，细胞存活抑制率差异 具有统计学意义；化疗药物和rsTRAIL联合处理K562细胞，Ras、丝裂原活化蛋白激酶 (MEK)和细胞外调节蛋白激 酶 (ERK)的活化受到抑制，应激活化蛋白激酶 (JNK)磷酸化水平上升；HU和rsTRAIL联合处理抑制凋亡抑制蛋白 c—FLIP和c-IAP1的表达。结论 HU促进rsTRAIL诱导的K562细胞凋亡可能通过抑制Ras—MEK—ERK信号通路，激活 JNK激酶，抑制c—FLIP和c—IAP1的表达。 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体；羟基脲；细胞凋亡；慢性髓细胞性白血病 中图分类号：R318．12 文献标志码：A 文章编号：1000—503x(2012)02—0146-07 DOI：10．3881／j．issn．1000-503X．2012．02．009 M olecularM echanism ofHydroxyureaEnhancesK562CellApoptosisInduced byTumorNecrosisFactor-relatedApoptosis-inducingLigand WUYao—min，ZHANGYa—xi，SHIJuan，LIUShi-lian，LIUYan-xin，ZHENGDe—xian NationalLaboratoryofMedicalMolecularBiology，InstituteofBasicMedicalSciences CAMSandPUMC，Beijing100005，China Correspondingauthor：ZHENGDe-xian Tel：010E—mail：zhengdx@pumc．edu．cn ABSTRACT：0bjective Toexplorethemolecularmechanism viawhichthechemotherapeuticdrug hydroxyurea(HU)enhancesK562cellapoptosisinducedbytumornecrosisfactor—relatedapoptosis—inducin