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核移植前导入目的基因 转基因动物的技术路线
二、转基因动物技术的主要步骤 获取外源目的基因 外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物 转基因胚胎的发育及鉴定 筛选所得的转基因动物 三、?转基因动物的技术路线 经典的技术路线? 目的基因 显微注射 ? 已交配的 取出 移植 受体动物 妊娠 供体动物 受精卵 输卵管 转基因动物 缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。 ?转基因动物的技术路线(续) ?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫 目的基因 非手术 胚胎移植 ? 体外受精 体外培养 多细胞胚胎 检测 整合外源基因 卵子 受精卵 或囊胚 的胚胎 精子 优点：受精卵的成活率高达90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。 ?转基因动物的技术路线（续） 核移植（克隆）的技术路线 目的基因 转基因动物? 导入 ? 动物胎儿成纤维细胞 妊娠 取核 ? 动物 去核 重组的 体外培养 囊胚期 胚胎移植 卵细胞 受精卵 胚胎 受体动物子宫? 特点：体细胞核移植；核移植前导入目的基因。 ?转基因动物的技术路线（续） 整合卵受精的技术路线： ? 目的基因 转基因动物 导入 逆转录病毒 妊娠 精子 感染 体外受精 胚胎移植 卵母细胞 成熟卵细胞 囊胚 受体动物子宫 ? 特点：卵母细胞导入目的基因后再与精子受精。 四、目的基因的制备和转基因的方法 目的基因的制备 ·目的基因的获得 逆转录合成法 化学合成法 PCR扩增法 ·目的基因的扩增 通过载体在宿主中克隆 通过PCR扩增目的基因 转基因动物的方法 · 显微注射法 · 生殖细胞载体法 · 胚胎干细胞法 · 病毒载体法 * * * * * * （一）用于提高动物生长速度 （二）用于改善畜产品的品质 （三）用转基因的动物生产药物 （四）用转基因动物作器官移植的供体 （一）用于提高动物生长速度 导入外源生长激素基因 （二）用于改善畜产品的品质 举例说明 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低。 （三）用转基因的动物生产药物 设问:就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？ 转基因动物的乳腺。 （1）乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响转基因动物本身的生理代谢
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