GB/T 15206-1994食品中胆固醇的测定方法.pdf

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  •   |  1994-08-10 颁布
  •   |  1994-08-10 实施

GB/T 15206-1994食品中胆固醇的测定方法.pdf

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GB/T 15206—1994 中华人民共和国国家标准 食品中胆固醇的测定方法 Method for determination of cholesterol in foods GB/T 15206—1994 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用分光光度计测定各类动物性食品中胆固醇的方法。 本标准适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。 2 原理 当固醇类化合物与酸作用时,可脱水并发生聚合反应,产生颜色物质。因 此可先对食品样品进行提取和皂化,用硫酸铁铵试剂作为显色剂,测定食品中 胆固醇的含量。 3 试剂 全部试剂除注明外均匀分析纯,实验用水蒸馏水。 3.1 石油醚。 3.2 无水乙醇。 3.3 浓硫酸。 3.4 冰乙酸:优级纯。 3.5 磷酸。 3.6 胆固醇标准物质。 3.7 胆固醇标准液。 3.7.1 胆固醇标准储备液(1 mg/mL):精确称取胆固醇 100 mg,溶于冰乙酸 中,并定容至 100 mL。此液至少在 2 个月内保持稳定。 3.7.2 胆固醇标准常备液(100μg/mL):吸取胆固醇标准储备液 10 mL,用 冰乙酸定容至 100 mL。此液用时临时配制。 3.8 铁矾显色剂。 3.8.1 铁矾储备液:溶解 4.463 g 硫酸铁铵[FeNH (SO) ·HO]于 100 mL85% 4 4 2 2 磷酸中,贮于干燥器内,此液在室温中稳定。 3.8.2 铁矾显色液:吸取铁矾储备液 10 mL,用浓硫酸定容至 100 mL。贮于 干燥器内,以防吸水。 3.9 50%氢氧化钾溶液:称取 50 g 氢氧化钾,用蒸馏水溶解,并稀释至 100 mL。 3.10 5%氯化钠溶液:称取 5 g 氯化钠,用蒸馏水溶解,并稀释至 100 mL。 3.11 钢瓶氮气:纯度 99.99%。 4 仪器和设备 4.1 实验室常用设备。 4.2 721 型分光光度计。 4.3 电热恒温水浴。 4.4 电动振荡器。 4.5 具玻塞试管:体积 10 mL、25 mL。 5 操作步骤 5.1 胆固醇标准线 中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 1994—08—101994—08—10 批准 199批准 1994—08—104—08—10 实施 实施 GB/T 15206—1994 吸取胆固醇标准常备液 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0 mL 分别置于10 mL 试管 内,在各管内加入冰乙酸使总体积皆达 4 mL。沿管壁加入 2 mL 铁矾显色液,混 匀,在 15~90 min内,在 560~575 nm 波长下比色。以胆固醇标准浓度为横坐 标,吸光度值为纵坐标做标准曲线。 5.2 样品测定 5.2.1 食品脂肪的提取与测定 根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪。 并计算出每 100 g 食品中的脂肪含量。 5.2.2 食品胆固醇的测定 将提取的油脂 3~4 滴(约含胆固醇 300~500μg),置于 25 mL 试管内,准 确记录其重量。加入 4 mL 无水乙醇,0.5 mL50%氢氧化钾溶液,在 65℃恒温水 浴中皂化 1 h。皂化时每隔 20~30 min 振摇一次使皂化完全。皂化完毕,取出 试管,冷却。加入 3 mL5%氯化钠溶液,10 mL 石油醚,盖紧玻塞,在电动振荡 器上振摇 2 min,静置分层(一般约需 1 h 以上)。 取上层石油醚液 2 mL,置于 10 mL 具玻塞试管内,在 65℃水浴中用氮气吹 干,加入 4 mL 冰乙酸,2 mL 铁矾显色液,混匀,放置 15 min后在 560~575 nm 波长下比色,测得吸光度,在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。 6 结果计算

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