降纤酶的分离纯化及其性质.pdf

( ) ISSN 清华大学学报 自然科学版 200 1 年 第 4 1 卷 第 12 期 2032 CN 112223N 　 ( ) , 200 1, . 4 1, . 12 6264 J T singhu a U n iv Sci T ech V o l N o 　 降纤酶的分离纯化及其性质 1 2 2 1 1 蒋宇扬 , 　张歧山 , 　张玉魁 , 　万　荣 , 　赵玉芬 ( 1. 清华大学 化学系, 生命工程研究院, 生命有机磷教育部重点实验室, 北京 100084; 2. 中国医科大学 生物工程研究中心, 沈阳 11000 1) 摘　要: 蛇毒蛋白对抑制血栓形成和溶解血栓具有较好的 th rom b in o f o th er snake venom. 疗效, 但由于得不到性质稳定、组分单一的酶蛋白, 影响了其 Key words: b a im eisnak e; defib ra se; p u r ificat ion; p rop ert ie s 临床效果。该研究通过亲和层析方法, 从长白山白眉蝮蛇乌 苏里种蛇毒中分离提纯到 图谱为单一组分糖蛋 SD S PA GE 4 长白山白眉蝮蛇乌苏里种蛇毒中的降纤酶是哺 白—— 降纤酶, 相对分子质量约 3. 6 ×10 。该酶具有体外凝 乳动物凝血及纤溶系统的蛋白酶。通过专一性的激 血、体内抗凝作用。等电点约为 4. 25。 分析结果表明 H PL C 其纯度为 99% 。最适温度为 70 ℃, 最适pH = 8. 0。动力学 活或灭活作用, 该蛋白酶作用于血液凝固、纤溶系统 研究表明该酶为一 酶, 常数为 的各个步骤, 产生促凝或抗凝效应。在体外引起血浆 M ich ae lis M en ten M ich ae lis 0. 320 , 最大反应速度为 0. 117 。 , 纤维蛋白原的凝聚, 起凝血作用; 在体内它不激活 mm o l L m o l m in ED TA M g2+ , Cu2+ 对其有抑制作用。测定该酶N 端 20 个氨基酸的 凝血因子 。所以由它水解而生成的纤维蛋白凝 序列是 ,