重组水蛭素ⅲ的分离纯化与鉴定 - 《中国药科大学学报》！.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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重组水蛭素ⅲ的分离纯化与鉴定 - 《中国药科大学学报》！.pdf

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重组水蛭素ⅲ的分离纯化与鉴定 - 《中国药科大学学报》！

学报 78 Journ l of Chin Ph rm ceutic l University 　2005, 36(1):78 ～ 81 Ⅲ 崔　莉, 谭树华, 章　良, 吴梧桐 (, 210009) 【　】　:从分泌型重组水蛭素Ⅲ基因工程菌发酵液中分离纯化水蛭素Ⅲ。 :将发酵液经离心、大孔吸附树脂处后, 用DEAE-cellulose DE52 离子交换层析, 进而用HPLC 反相层析。 :总收率达50%以上, 纯度达99.9%, 比活力达9 000 ATU/mg。 :分离纯化系统令人满意, 回收率较高。【】　重组水蛭素Ⅲ;纯化;反相高效液相色谱法【】　Q516 　　【】　A　　【】　1000-5048(2005)01-0078-04 　　, ;HP 1100 LC/MSD 。 , 65 ～66 , 1.2　试品与试剂 [2] [3] , 3 。N- ( );( ); HV1, HV2, HV3 (); 。M rkw rdt 1904 , ();M rker ( [1] 1970 。 );(Hoechst )。 , 2 　。 , 2.1　大孔吸附柱处。 HP20 , 20 mmol/ ,Hoechst L , pH 5.0 ～6.0, (lepirudin,Refludon),、 , 1 ml/min (hep rin-induced throm-bocytope- 。20 mmol/L 、50 mmol/L Tris-HCl、 ni ,HIT)。,Nov rtis 15%20 mmol/L , 30% (Desirudin) 20 mmol/L , 。。 2.2　阴离子交换柱色谱、 DEAE-cellulose DE52 20 mmol/L Ⅲ , 。 , 1.0 mol/L pH 6.0 , , 0 ～ 1 　 0.3 mol/L N Cl 20 mmol/L (pH 6.0) 1.1　仪　器 , 。 V-Ⅱ( 2.3　制备型RP-HPLC );DY-501 ( :Resource RPC ;:A );TH-300 (); 0.1%TFA/H O, B CH CN;:0 ～35 min, B: 2 3 AKTA 、Resource RPC