科学技术成果鉴定证书 - 云南省第一人民医院.docVIP

建议密级 批准密级 科学技术成果鉴定证书 鉴字[ ] 号 成 果 名 称：STK33在肺癌细胞系及人体肺组织中的表达研究 完 成 单 位：云南省第一人民医院 鉴 定 形 式：会议 组织鉴定单位：云南省卫生厅 鉴 定 日 期：2011.5.3 批准鉴定日期：2011.4.27 云 南 省 科 学 技 术 厅 一、简要技术说明及主要技术性能指标 1.特异性较高STK33的初步肿瘤检测分析 在8大肺癌细胞系中，应用Beas-2b、801d作为对照组，我们采用q-RT-PCR方法证实其他细胞系STK33表达明显高于对照组，表明在正常组织中Stk33处于失活或封闭状态；在肿瘤病理状态下肺癌细胞可通过自身不断增殖，诱导Stk33磷酸化Vimentin，从而导致细胞骨架的重组，促进肿瘤发展。采用Western-blot方法通过Image J软件检测Stk33蛋白之表达量，在探测区域等同的情况下（Area=6016），Beas-2b作为对照组，其他细胞系表达明显高于对照组，据上述推测，STK33在肺组织发育过程中及肺癌的发生发展过程中，具有重要作用。实时荧光定量PCR结果显示，NSCLC患者肺癌组织、远癌组织中STK33平均ΔCT值分别为8.68±2.01，9.73±1.45。NSCLC患者肺癌组织STK33基因表达量高于远癌组织，且两者比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，提示STK33在NSCLC的发生发展中的影响不容忽视。NSCLC患者肺癌组织与良性病变患者组织中STK33平均ΔCT值分别为8.68±2.01，10.46±0.87。NSCLC患者肺癌组织STK33基因表达量高于肺良性病变的肺组织，且两者比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，提示STK33基因与肺癌发生发展之间有密切关联。 2. 临床应用 STK33蛋白在肺正常组织及肺良性病变组织中表达均为阴性，失表达；肺癌组织STK33蛋白总的表达率为79.0%（51/64），正常肺组织及肺良性病变组织中与肺癌各组织类型间差异有统计学意义（p0.01）。χ2检验显示，STK33蛋白表达与性别、年龄、肿瘤大小无明显关（p0.05），而与组织学类型、细胞分化程度、有无淋巴结转移及PTNM分期有明显关系(p0.05)。鳞癌、腺癌、腺鳞癌，Stk33蛋白表达的阳性率分别为61.0%（16/26例），P=0.034；90.0%（18/20例）P=0.022,87.0%（7/8例）P=0.025。本组资料中高分化48例、中分化6例、低分化10例，Stk33蛋白在高分化、中分化、低分化三组之间表达的差异存在显著性意义68.0%（26/48例）vs83.0%（5/6例）vs100%（10/10例）；P =0.011。STK33蛋白表达的阳性率在有无淋巴结转移的肺癌组织中具有显著性差异67.0%(32/48例)vs100%(16/16例)P=0.000。本组资料中Ⅰ期37例、Ⅱ期16例，Ⅲ期11例，Stk33蛋白在TNMⅠ期、Ⅱ期和Ⅲ期三组之间表达的差异存在显著性意义67.6%（25/37例）vs81.3%（13/16例）vs100%（11/11例），P=0.018。标志着STK33蛋白的表达增高使肿瘤细胞更具有恶性表型和恶性行为。提示STK33蛋白可能成为非小细胞肺癌和小细胞肺癌患者评价预后的重要分子标志物。在体外促进细胞增殖的活性 1 二、推广应用前景与措施 根据该研究成果撰写了2篇论文，均为国内核心期刊论文（《STK33蛋白在肺癌 乳腺癌 结肠癌组织中的表达研究》：中国肿瘤临床；《STK33基因在非小细胞肺癌中表达的临床研究》：中国癌症杂志；表明该研究结果已得到国内外同行专家的认可，值得推广应用。 根据该研究所涉及的基本技术、基本方法、研究结果和结论，在我院肿瘤外科、胸外科、我省病理学学术会议，得到了临床和病理学医师、生物学工作者的首肯，表达了STK33基因在临床肿瘤病理诊断特别是乳腺癌中的广阔临床应用和科研前景，表示愿积极配合该研究成果的推广应用。 本研究建立了STK33临床病理免疫组化检测体系，除了应用于肺组织外，同时可将该体系用于肝癌，乳腺癌，结肠癌等病变的研究和临床检测。 STK33在鳞癌的表达显著高于在基底细胞癌中的表达，可作为两者的鉴别指标；与乳腺癌的其它标志物相比在癌中的表达频率更高（79.0％），因此该基因用于乳腺癌的筛选检测敏感性更高；在肺癌中定位清晰，染色背景好，特异性较高。与传统的病理形态学观察比较，STK33应用于评估肺病变的恶变风险度更客观、更直接，在良好的室内质控体系下，STK33的表达有强弱之分，并且受人为因素的干扰小。因此，STK33表达也可能与乳腺癌的治疗及预后有关。 细胞学研究表明STK33通过促进细胞增殖参与了乳腺肿瘤的