dylight405 免疫荧光检测试剂盒（山羊） dylight405 .pdfVIP

DyLight405 免疫荧光检测试剂盒 （山羊） DyLight405 Immunofluorescence Detection Kit (Goat) 品编号：E670011 包装规格：100 Tests/300 Tests 品简介 免疫荧光检测试剂盒系列用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用 疫荧光检测试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。 本试剂盒含有DyLight405 标记的兔抗山羊IgG (H+L) 抗体，可以用于检测山羊来源的相应一抗，在荧光显微镜或激光 h 共聚焦显微镜下可以观察到明亮的蓝色荧光。 DyLight405 是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。它比绝大部分常用的蓝色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而 c 且背景更低。DyLight405 的吸收（激发）和发射峰分别为400 nm 和421 nm。 e 品特点 t 1. 本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。 o 2. 操作简便，灵敏度高。 i 保存条件 b 兔抗山羊DyLight405标记二抗和抗荧光淬灭封片液-20 C避光保存，其它试剂2-8 C保存，保质期12个月。 试剂盒组成 n 组分 o 100 Tests 300 Tests 试剂 A 封闭液 (Blocking Solution) 10 mL 30 mL 试剂 B 兔抗山羊DyLight405标记二抗 (DyLight405 Conjugated Rabbit Anti-Goat IgG) 100 μL 300 μL g 试剂 C 免疫荧光染色二抗稀释液 (Secondary Antibody Dilution Buffer For IF Staining) 30 mL 90 mL 试剂 D 抗荧光淬灭封片液 (Anti-Fade Mounting Medium) 3 mL 10 mL n 操作步骤 a A. 免疫荧光染色的准备工作 s 荧光标记二抗的稀释：将荧光标记的二抗按照1:50-1000的比例用本试剂盒提供的免疫荧光染色二抗稀释液进行稀释。根 据荧光的强弱，其稀释比例可以适当地提高或降低。 B. 贴壁细胞 1. 细胞爬片，PBST洗3次，每次5 min。 2. 加入1 mL预冷的固定液，室温固定10 min或更长时间。 3. PBST洗3次，每次5 min。 4. 0.1-0.5%Triton X-100室温通透10-15 min。 5. PBST洗3次，每次5 min。 6. 封闭液室温封闭30-45 min。 7. 一抗室温孵育60 min，为增强与一抗的结合，建议4 C孵育过夜，次日室温孵育60 min。 8. PBST洗4次，每次5 min。 9. 加入50 μL稀释的荧光标记的二抗，避光孵育45-60 min。 10. PBST洗3次，每次5 min，期间适当注意避光操作。 11. 如有需要可进行DAPI或Hoechst复染细胞核。 12. 抗荧光淬灭封片液封片，指甲油密封盖玻片。 13. 荧光显微镜下可以观察到蓝色的荧光。 C. 悬浮细胞 1. 离心收集细胞样品于1.5 mL离心管中，吸除上清后轻轻弹散细胞。 2. 加入0.5 mL固定液，混悬细胞，固定10 min或更长时间。 3. 离心去除固定液，PBST洗3次，每次5 min。 4. 0.1-0.5%Triton X-