聚乙二醇定点修饰hafgf 突变体 - 化学通报.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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聚乙二醇定点修饰hafgf 突变体 - 化学通报.pdf

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聚乙二醇定点修饰hafgf 突变体 - 化学通报

2004 67 w82 haFGF * ( 510632) mPEG5000 (haFGF)31 cys haFGFSer98,132 -6- -mPEG5000 aFGFSer98,132 30/1 25 4h SDS 30%27kD55.53% haFGF Mutant Site-directed Modified by PEG Huang Zhifeng, Zheng Qing*, Su Zhijian, Wu Xiaoping, Huang Yadong, Xu Hua, Zhao Wen, Li Xiaokun, Qu Hongyan, Yu Pingye (Biopharmaceutical RD Center of Jinan University, Guangzhou 510630) Abstract mPEG5000 was site-directed coupling to the 31st Cysteine residue of human acid fibroblast growth factor mutant, of which the 98th and the 132nd cysteine residue was replaced by Serine residue. The modified reaction was conducted at 25 for 4h. The optimal mol ratio of maleimide-6-aminocaproyl- mPEG5000 ester vs haFGFSer98,132 was 30/1. The modified products were analysed by reversed-phase HPLC and SDS. The result indicated that the modification rate was up to 30% and the apparent molecular weight of the PEG-haFGF conjugate was 27kD. The final product PEG-haFGF was purified to homogeneity by Heparin affinity chromatography. The activity of the purified PEG-haFGF remained 55.53% of the activity of the haFGF mutant. Key words Human acid fibroblast growth factor mutant, PEG, Site-directed modification (haFGF) haFGF [1] Enzon 24 *E-mail: qz01cn@163.com (010424)863 (2001AA2151312002AA2Z3318) 2003-09-22 2004-02-20 2004 67 w82 PEG-PEG- PEG- α2b-2[2~4] haFGF 3198132 (Cys) haFGF Cys SerAla aFGF [5]98132 Cys 31 Cys -6- -mPEG5000 31 Cys haFGF 1 1.1 Agilent MK3 754