益气补肾方药对自然衰老及肾虚致衰老小鼠免疫衰老的防治研究.pdf

中文摘要 益气补肾方药对自然衰老和肾虚致衰老小鼠 免疫衰老的防治研究 摘 要 l衰老足生命的自然过程，衰老机体表现为对外界刺激因子的适应 能力降低，患感染性疾病和肿瘤的机会增加。以上事实主要归因于随 机体衰老，免疫功能出现进行性下．降，即免疫系统老化或免疫衰老， 尤其是T细胞功能出现严重缺陷。免疫机能受损后，又会导致机体容 易出现多种疾病，加速衰老的进程，严重影响老年人的健康。研究免 疫衰老的分子机制及延缓免疫衰老的方法，对健康地渡过老年阶段有 重要意义。 祖国医学认为，衰老与机体肾中精气的虚衰有关，温补肾虚的中 药可减缓衰老的进程。通过生理学和生物化学研究表明，补’肾药可通 过调节内分泌、免疫及生殖系统的功能来延缓衰老。 衰老模型是研究延缓衰老方法及其作用机制的关键一环，直接关 系到实验结果的实际意义。本研究选用20月龄的老龄小鼠作为自然 衰老模型，同时给10月龄(接近衰老)小鼠注射醋酸可的松，造成 小鼠肾虚，作为“肾虚致衰老”模型。 金匮l肾气方为我国传统补肾方药，该方滋补肾虚、延缓衰老的作 用已被世人所公认。人参和黄芪是很好的补气药，同时还具有促进淋 巴细胞增殖和提高细胞因子IL一2活性的作用。在补肾药中加入适量的 人参和黄芪，可更好地增强其补肾效果，把该方定名为益气补肾方药 vital combinedwith kidney，SVEplus energy tonilying (strengthening TK)。 与衰老有关的免疫功能变化，主要由T细胞功能的改变所致。T 细胞功能的改变可能归因于多种综合因素的异常：T细胞增殖、细胞 因子的产生、黏附分子的表达、参与调控多种免疫分子表达的转录因 子NF—KB的活性及激活诱导的T细胞凋亡等。 基于上述观点，本研究用自然衰老小鼠和醋酸可的松致肾虚小鼠 中文摘要 为模型，在整体水平，从淋巴细胞增殖、细胞因子和黏附分子基因表 达、T细胞NF—K B活性、T细胞激活诱导的T细胞凋亡等方面探讨了 自然衰老和“肾虚致衰老”的免疫学机制，同时，观察并比较了益气、 补肾及益气补肾方药对免疫系统老化的防治作用。目的是系统地探讨 传统中药复方延缓衰老的免疫学机制。 同时，以公认的人胚肺成纤维细胞为衰老模型，在细胞水平观察 J，人参的主要成分人参皂甙对细胞增殖活性的调节及作用机制，迸一 步证实人参皂甙抗细胞衰老作用，并为益气方药可提高补肾药的作用 提出可靠的证据。研究分以下几个部分： 1 益气补肾方药调节老龄和肾虚小鼠淋巴细胞增殖、细胞因子IL一2 和IL一12基因表达的研究 给自然衰老和肾虚小鼠灌服益气、补肾和益气补肾方药，经MTT 法观察1r不同方药对脾脏淋巴细胞增殖的影响；用胸腺细胞增殖法检 RT—PCR的方法观察了脾脏淋巴细胞经ConA刺激后，细胞因子IL一2和 IL一12 mRNA的表达，结果如下： 的水平差异不显著。另外，老龄小鼠的IL一2和IL一12mRNA表达也比 低龄小鼠分别下降45％5阳42％。 给老龄小鼠灌服益气、补肾及益气补l肾方药后，淋巴细胞增殖指 诱导的细胞增殖的促进作用显著高于益气方药(p0．05)。三种方药都 能显著增加老龄小鼠ConA诱导的脾脏淋巴细胞IL．2的活性及ConA 肾方药与益气和补肾方药比有显著性差异(均p0．05)。同时，三种 105％；对IL一12的mRNA 方药对IL一2的mRNA表达分别提高19％、67％f[I 表达也有促进作用，分别提高69％、94％5阳105％。 中文摘要 1．2肾虚小鼠脾淋巴细胞增殖能力、IL．2活性及IL—12产生水平均明 mRNA也比对照降低 显比低龄小鼠下降(p0．叭或p0．05)；1L一2 24％。 三种