X-连锁迟发性脊髓骨骺发育不良家系的基因诊断.pdfVIP

生堡捡验匡堂盘查垫!Q至!旦筮!!鲞筮!期g堕!』l坐丛旦：!!堡垫!Qt!些垫：盟堡垒 ·527· ．临床实验诊断研究· X一连锁迟发性脊髓骨骺发育不良家系的 基因诊断 王莉姚丰廖世秀王应太杨艳丽黄飞飞 【摘要】 目的 探讨一个X-连锁迟发性脊髓骨骺发育不良(X-linkedspondyloepiphyseal dysplasiatarda，SEDL)家系发病的分子机制，建立基因诊断方法。方法采用身高测量、影像学检查 及家系分析进行临床诊断。收集相关家系成员的外周血标本。提取基因组DNA后，采用PCR-SSCP 和DNA测序分析家系中先证者、携带者和健康人SEDL基因的第3～6外显子。利用微卫星位点 DXSl6进行连锁分析。结果PCR—SSCP检测到先证者第4外显子有异常泳动带；第4外显子的序列 分析表明3例先证者均存在C．218CT突变，导致氨基酸序列$73I．改变，3例携带者均存在该核苷 酸位点的杂合突变，健康人未见突变；先证者的第3、5和6外显子核酸序列未见突变。序列分析证实 家系中3名未婚女性Ⅲ10、1V6和Ⅳ7为致病基因携带者。结论C．218CT突变是导致该家系发病 的分子机制，可采用第4外显子序列分析对该家系进行基因诊断和产前基因诊断。 【关键词】 骨软骨发育不良； 系谱；转录因子；膜转运蛋白质类； 聚合酶链反应； 多态 现象，单链构象 Gene ofX-linked tardaWANG Shi- diagnosis spondyloepiphysealdysplasia Li，YAOFeng．UAo MedicalGeneticInstituteltenanProvincial xiu，WANGYing-tai，YANGYan—li，HUANGFei-fei of People’s 450003，China Hospital，Zhengzhou Corresponding口眦，lor：WANGYing-tai，Email：W妊D08@yahoo．com．cn To themolecular ofa ofX-linked 【Abstract】Objectiveinvestigate pathogenesispedigree toestablishmethodsof Clinical atarda(SEDL)and diagnosis．Methods spondyloepiphysealdysplasia gene Was examinationand madebasedon diagnosis hei。ghtmeasurement，radiologicalpedigreeanalysis．Peripheral blood ofrelevant memberswerecollected．AfterDNA strand samples family genomicextraction，single with 3- conformation DNA WasusedtodetectSEDL exons polymorphism(SSCP)followedsequencing gene 6．MicrosatellitemarkerDXSl6wasselectedfor r11leabnormal linkageanalysis．Results electmphorefic bands