附子、吴茱萸质量生物检定方法探索性探究.pdfVIP

目 录 1 摘要……………………………………………………………1 1．1 中文摘要………………………………………………………1 1．2 英文摘要………………………………………………………3 1．3 前言……………………………………………………………5 1．4 附子生物检定方法的研究……………………………………10 1．4．1附子对离体心脏作用生物检定实验方法探索性研究………10 1．4．2附子抗休克作用生物检定……………………………………30 1．5 吴茱萸镇痛生物检定方法的研究……………………………34 ]06 讨论……………………………………………………………42 1．7 结论……………………………………………………45 1．8 参考文献………………………………………………………47 2 致谢……………………………………………．50 3 附子质量控制研究现状和展望(综述)……………………51 I㈣磐辫 附子、吴茱萸质量生物检定方法探索性研究 摘 要 目的：以代表性道地药材附子、吴茱萸为研究示范对象，在前期 吴茱萸、附子毒效规律和物质基础研究的基础上，根据吴茱萸、附子 传统功效(药性、功能、主治)和预实验结果选定代表性药效／毒性 评价指标，采用生物效价测定法(定量)和生物活性限值测定法(半 定量)建立生物质量控制方法。方法：主要采用体外方法，辅以体内 方法进行，主要选取附子强心、抗休克作用：吴茱萸镇痛、解痉作为 实验指标探索性进行生物效价评价。附子强心作用采用对正常SD大 鼠的Langendorff离体心脏灌流，给入受试药后观察心率的变化；抗 休克作用通过尾静脉注射内毒素来研究附子对内毒素所致动物休克 死亡的对抗作用。吴茱萸镇痛、解痉作用分别采用家兔离体肌张力影 响和小鼠醋酸扭体反应试验。结果：在定性实验中，都能验证附子强 心、抗休克作用和吴茱萸具有镇痛、抑制平滑肌收缩作用；附子水煎 液对内毒素致小鼠休克能延长其存活时间及存活百分率，表明附子水 溶性部分对内毒素引起的休克有治疗作用。体外肌张力实验中，吴茱 萸醇提或水提液随着浓度的升高，对平滑肌的抑制作用也加大；体内 镇痛实验中可得出，吴茱萸水提、醇提对于腹腔注射醋酸引起小鼠急 性腹膜炎而产生持久的疼痛刺激都有抑制作用，且有显著性差异。采 用半定量法建立生物质量控制方法，得出附子生物碱提取物剂量为： 10。g原生 55．69x10。39原生药／ml×3ml时对心率起提升作用，55．69x 药／ml×6ml时开始出现心率，达到中毒剂量；55．69x10。g原生药／ml ×5ml是最大耐受量和最小中毒剂量的临界点。结论：所优化建立的 实验体系符合附子生物检定的要求。本法有可能成为现行附子质量控 制方法的～种补充。通过本实验，初步以药理学指标来检定不同样品 的药效反应。 关键词：附子；吴茱萸；生物效价评价；毒性研究；质量评价 A of on method preliminarystudyAconite，Evodiabioassay Abstract： the ofdemonstration abjective：For study objects： aconitetraditional representativegeoherbsaconite，EvodiaEvodia，the efficacy thebasisof