人脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞株u87上皮间质转化及皮下荷瘤能力 .pdfVIP

( ) 2016 12 6 6 Chin J Cell Stem Cell (Electronic Edition), Dec 2016,Vol.6, No.6 中华细胞与干细胞杂志 电子版 年 月第 卷第 期 369 · · · · 论著 人脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞株 U87 上皮间质转化及皮下荷瘤能力的 影响 1 2 2 3 1 1 1 1 刘高米洋 和法莲 陈慧芬 陆容 李自安 何洁 赵晶 潘兴华 【摘要】 目的 研究人脐带间充质干细胞（hUCMSCs ）体外模型中对胶质瘤细胞株 U87 荷瘤能力及其上皮间质转化（EMT ）的影响及其可能机制。方法 建立裸鼠皮下荷瘤模型，观察 hUCMSCs 与 U87 共培养组和 U87 单独荷瘤组皮下荷瘤能力的差别，免疫组化检测 EMT 相关 基因组织表达水平，Western Blot 检测 EMT 相关蛋白MMP2 ，MMP7,MMP9，E-cadherin （E-cad ）， N-cadherin （N-cad ）和 Vimentin （VIM ）表达情况，qPCR 检测 EMT 相关基因（mmp2 ，mmp7， mmp9，E-cad，N-cad 和 vimentin ）转录水平。Transwell 和 Matrigel 分别检测 hUCMSCs 对 U87 t 转移能力的影响，两组间比较拟采用独立样本 检验，多组间比较采用单因素方差分析。结 果 皮下荷瘤结果提示 hUCMSCs 与 U87 共培养组皮下荷瘤率高于 U87 单独荷瘤组，且肿瘤体 积较大，RT-PCR 结果提示：共培养组和单独培养组相比，E-cad 水平下调，N-cad 和 VIM 上调， 且基质金属蛋白酶家族 MMP2 ，MMP7，MMP9 也有不同程度上调。Western blot 结果提示：在 蛋白水平共培养组和单独培养组相比，E-cad 水平下调 2.1 倍，N-cad 和 VIM 上调 1.0 倍，MMP9 上调 0.9 倍；E-cad，N-cad，VIM 以及 MMP2 变化结果与 RT-PCR 结果一致。免疫组化结果进一 步验证 hUCMSCs 能促进 U87 表达 Ki67，E-cad 与 N-cad 低表达。Transwell 和 Matrigel 实验结 果提示 hUCMSCs 能够促进 U87 细胞的转移侵袭能力。结论 hUCMSCs 能通过促进 U87 高表 达 EMT 相关基因和增殖相关基因Ki67，从而促进胶质瘤细胞株 U87 皮下肿瘤形成并发生上皮 间质转化，提示 hUCMSCs 临床应用中应该充分考略受试者是否是潜在胶质瘤患者。 【关键词】 脐带； 间质干细胞； 胶质瘤； 生物转化 Effects of human umbilical cord mesenchymal stem cell on epithelial-mesenchymal transition 1 2 2 3 and growth of Glioma cell line U87 Liu Gaomiyang , He Falian ,Chen Huifeng , Lu Rong , L