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微生物学报 !#$ %’()(*(+$ ,-$
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免疫共沉淀筛选细胞内与 型流感病毒 蛋白相互作用的
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蛋白
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李耀东 ,关振宏 ,严景华
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(中国科学院微生物研究所,北京 $%%$%$)
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(中国科学院研究生院,北京 $%%%! )
A 吉林大学畜牧兽医学院,北京 )
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摘要:【目的】筛选细胞内与 型流感病毒 蛋白( )相互作用的蛋白质。【方法】将 编码序列插
( M- (3 M- (3 M-
入真核表达载体 62(NN/H2E;* ,重组质粒 62(NN/H2E;*H(3 M- 转染 OIPH-AC 细胞,裂解细胞,以E;* 单抗
偶联的琼脂糖球珠免疫沉淀 蛋白,清洗去除非特异性结合的杂蛋白后, 银染法显示与
(3 M-HE;* /Q/HR(NI
(3 M- 共沉淀的蛋白,从胶上切下此蛋白条带进行质谱分析。【结果】成功构建了(3 M- 的表达质粒,免疫印
迹证实了(3 M- 蛋白在-AC 细胞中能够表达,免疫共沉淀筛选到与 (3 M- 结合的多种蛋白,分析质谱结果,
确定 和 个真核翻译起始因子( )为候选蛋白。【结论】 与 相互作用为流感病毒感
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染或接种流感疫苗引发小脑性共济失调提供了解释, 与 相互作用表明 可能在调控病毒蛋白
D.E (3 M- (3 M-
合成方面起重要作用。
关键词:免疫共沉淀; 型流感病毒 蛋白;质谱;蛋白相互作用
( M-
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
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流感病毒( )是流行性感冒的病原 杂志刊登了 蛋白的晶体结构和 结构,详
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