倪坤仪-分析化学（二）色谱概论.pptVIP

第17章 色谱分析概论 第一节 色谱法概述 一、色谱法的由来 色谱：Chromatography Chroma---色彩；graphy---图谱 1906年由俄国植物学家Tsweet创立 植物色素分离见图示 色谱起源 图示 固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 液相色谱流程图 气相色谱仪的组成 三 、色谱法的发展史 (一)、历史： 30年代： 茨维特分离绿叶色素 40年代： 薄层色谱（TLC），纸色谱(PC) 50年代： 气相色谱（GC）出现使色谱具备分离和在线分析功能 60年代末： 高效液相色谱(HPLC)出现，使色谱分析范围进一步扩大 80年代SFC,CE (二)、发展与展望： 1．新型固定相和检测器：DAD，蒸发光散射D，荧光D 2．联用仪器：GC-MS，HPLC-MS（光谱分析具强大定性功能，色谱分析具强大的分离功能） 3．智能化发展：色谱专家系统 四、色谱法定义、实质和目的 色谱法：也称层析法，色层法 1.利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法 2.利用物质在不同的两相中溶解、吸附、离子交换等作用的差异而使混合物中各组分达到分离的方法 3.利用组分在两相间（固定相、流动相）分配系数不同而进行分离的技术 实质：分离 目的：定性分析或定量分析 五、色谱法的特点 优点：“三高”、“一快”、“一广” 缺点： 第二节、色谱法的分类： 1．按两相分子的聚集状态分： 续前 2．按固定相的固定方式分： 3．按分离机制分： 图示 色谱法简单分类 第三节 色谱法的原理 一、色谱基本概念 二、分配系数K与保留行为的关系 三、分配等温线（了解） 四、基本类型色谱法的分离机制 五、色谱过程与色谱过程方程式 六、色谱法基本理论（塔板理论与速率理论） 一、基本概念 (p436) 1．流出曲线和色谱峰 2．基线、噪音和漂移 3．保留值：色谱定性参数 4．色谱峰的区域宽度：色谱柱效参数 5.分离参数 6.相平衡参数 7.相对保留值（α） 1．流出曲线和色谱峰 流出曲线（色谱图chromatogram ）：电信号强度随时间变化曲线 色谱峰：流出曲线上突起部分 续前 对称因子(sysmmetry factor) (拖尾因子,T) 2．基线、噪音和漂移 基线（baseline)：当没有待测组分进入检测器时，反映检测器噪音随时间变化的曲线（稳定—平直直线） 噪音：仪器本身所固有的，以噪音 带表示（仪器越好，噪音越小） 漂移：基线向某个方向稳定移动 （仪器未稳定造成） 3．保留值：色谱定性参数(时间参数，体积参数) 保留时间(retention time，tR):从进样开始到组分出现浓度极大点时 所需时间，即组分通过色谱柱所需要的时间 死时间(dead time，tm，t0):不被固定相溶解或吸附的组分的保留时间（即组分在流动相中的所消耗的时间），或流动相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间，又称流动相保留时间 调整保留时间(adjusted retention time，tR’ )：组分的保留时间与死时间之差值，即组分在固定相中滞留的时间 图示 续前 保留体积（retention volume，VR）：从进样开始到组分出现浓度极大点时所消耗的流动相的体积 死体积(V0 、 Vm )不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流动相的体积，又指色谱柱中未被固定相所占据的空隙体积，即色谱柱的流动相体积（包括色谱仪中的管路、连接头的空间、以及进样器和检测器的空间） 续前 调整保留体积VR’：保留体积与死体积之差，即组分 停留在固定相时所消耗流动相的体积 4．色谱峰的区域宽度：色谱柱效参数(p437) 标准差σ：正态分布色谱曲线两拐点距离的一半 σ→对应0.607h处峰宽的一半 注：σ↓小，峰↓窄，柱效↑高 半峰宽W1/2：峰高一半处所对应的峰宽 峰宽W：正态分布色谱曲线两拐点切线与基线相交 的截距 图示 5.分离参数 续前 分配系数K（平衡常数，partition coefficient）：指在一定温度和压力下，组分在色谱柱中达分配平衡后，在固定相与 流动相中的浓度比（色谱过程的相平衡参数） 容量因子（容量比，分配比,capacity factor）k：指在一定温度和压力下，组分在色谱柱中达分配平衡时，在固定相与流动相中的质量比——更易测定 图示 三、分配等温线（了解） 分配等温线： 指一定温度下，某组分在两