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精子活力伊红苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
精子活力伊红苯胺黑(eosin-nigrosin)染色试剂是一种旨在使用伊红染料致死亡精子着色从而确定细胞活力的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞在男科学Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力(vitality)、运动能力(motility)、授精潜力(fertilizing potential)、膜结构完整性(integrity)、顶体反应(acrosomal reaction)功能的评价是精子分析的重要指标,也是决定人工受孕或体外授精(in vitro fertilization;IVF)的重要参数。无需相差显微镜phase-contrast microscope)便可清晰观察到细胞染色情况,同时可以定量计数。
产品内容
染色液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避光,有效保证3月
用户自备
1.5毫升离心管或96孔板细胞培养板:用于样品操作的容器
恒温水槽:用于孵育精子细胞液化
血细胞计数器:用于细胞计数
盖玻片:用于精子细胞爬片
一般光学显微镜:用于观察染色的精子细胞
实验步骤
移取新鲜获得的精液(30分钟至1小时内)到1.5毫升离心管
放进37℃恒温水槽孵育30分钟
轻柔涡旋震荡5秒
移取50微升上述精液到96孔板的1个孔里或新的1.5毫升离心管
加入微升 染色液(Reagent A)
用200微升枪头上下抽吸混匀
室温下孵育30秒
即刻移取12微升到洁净的载玻片一端
用盖玻片或另一个载玻片推片
置于空气中凉干
即刻在一般光学显微镜下(1000倍;即油镜下)观察并计数(注意:每个视野计数200个精子)
分析结果:粉红或红色染色的精子细胞为死亡细胞,而不染色的精子细胞为活体精子细胞
注意事项
本产品为50次操作
操作时须戴手套染色液(Reagent A)37℃水浴温育混匀后即可使用
本产品可用于区别非游动性精子细胞的活力与否
样品检测前,建议在血细胞计数器上进行精子细胞计数,同时观察精子游动
精子细胞计数时乘上稀释倍数104。标准血细胞计数器(Hemocytometer)的计算方法是:
1毫米方块的细胞计数X 104(稀释倍数)=实际细胞数/毫升
避免染色时间超过300秒钟,否则由于其毒性导致精子细胞死亡
本产品可用于染色稀释过的或冻存过的精子细胞
本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品
质量标准
本产品经鉴定性能稳定
本产品经鉴定着色清晰
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