阪崎肠杆菌随机突变体库的构建.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2012, Vol.28, No.11 阪崎肠杆菌随机突变体库的构建 1，2 ，3 2 2 2 董晓晖 ，吴清平 ，莫树平 ，杨小鹃 （1.中国科学院南海海洋研究所，广东广州510301）（2.广东省微生物应用新技术公共实验室，广东省菌种保藏与 应用重点实验室，广东省微生物研究所，广东广州 510070）（3. 中国科学院研究生院，北京 100049） 摘要：阪崎肠杆菌（Cronobacter （Enterobacter sakazakii））是一种以婴幼儿奶粉为主要致病源的食源性致病菌。至今人们对其 功能基因所知不多，毒力因子和致病机制研究都未能找到突破口。本研究利用质粒pTnMod-okm 和pBSL180 构建阪崎肠杆菌随机突 变体库，最终以工程菌Escherichia coli WM3064 及其所含质粒pBSL180 成功构建了阪崎肠杆菌随机突变体库，并通过阪崎肠杆菌显 色培养技术和抗生素抗性标记（卡那霉素50 μg/mL）对重组子进行筛选，建立了该菌功能基因组研究平台。在后继研究中不但可以 实现对单个基因进行定位及功能研究还可找到有相似功能的一类基因，为抗性机制和致病机理研究奠定基础。 关键词：阪崎肠杆菌；转座子；突变体库 文章篇号：1673-9078(2012)11-1454-1458 Generation of a Cronobacter (Enterobacter sakazakii) Mutant Library 1,2,3 2 2 2 DONG Xiao-hui , WU Qing-ping , MO Shu-ping , YANG Xiao-juan (1.South China Sea Institute of Oceanology, Guangzhou 510301, China) (2.Guangdong Open Laboratory of Applied Microbiology and Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Culture Collection and Application, Guangdong Institute of Microbiology, Guangzhou 510070, China) (3.Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) Abstract: Cronobacter (Enterobacter sakazakii), a pathogen commonly found in powdered infant formula (PIF), is an important food-borne pathogen. At present, very limited information is available regarding the function of genes, virulence factors and the pathogenesis of Cronobacter. In this study, plasmid pTnMod-okm and pBSL180 were used to build Cronobacter random mutant library. Finally, the mutant library of Cronobacter