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脑梗塞患者血中一氧化氮对血小板功能影响
脑梗塞患者血中一氧化氮对血小板功能影响【摘要】目的 研究脑梗塞患者血中一氧化氮(NO)的含量与血小板功能之间的关系。方法 将20例脑梗塞患者分别于发病急性期和稳定期采用硝酸还原酶法测血中NO含量;用光电比浊法和免疫荧光分析法分别测定血小板聚集率(PAgT)和血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)水平;同时检测正常对照15例。结果 血清中NO含量在发病急性期较正常对照明显增高(P0.05)。
1.2 方法
1.2.1 标本制备:全部患者于发病的急性期(第一天)及稳定期(治疗后第七天)分别空腹抽取静脉血,以1ml静脉血离心3000rpm,10min,分离血清冰冻保存用于NO测定;以4.5ml静脉血,加0.5ml,109mmol/L枸橼酸钠抗凝,离心后分别制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP),用于PAgT测定;以1ml静脉血,0.1ml,3%EDTAK2抗凝,离心后取血浆-30℃低温保存,用于血小板GMP-140测定。
1.2.2 血清中NO含量测定:采用硝酸还原酶法。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,按试剂盒说明书操作。
1.2.3 PAgT测定:采用光电比浊法。ADP(终浓度6μmol/L)和ADR(终浓度1:100)两种诱导剂。血小板聚集、凝血因子分析仪为北京中勤世帝科学仪器有限公司产品。
1.2.4 血小板GMP-140的测定:采用免疫荧光分析法。CD62荧光抗体由上海复兴生物制剂所提供,流式细胞仪为美国库尔特公司产品,按说明书操作。
1.2.5 统计学处理:数据以均数±标准差(X±S)表示,组间比较用t检验。
2结果
2.1 脑梗塞患者血中NO的含量变化
结果发现,脑梗塞患者于发病急性期血中NO的含量较正常对照组高,而稳定期血中NO含量降至正常对照组水平(见表1)。
*与正常对照组相比P0.05
2.2 脑梗塞患者PAgT的变化
无论以ADP还是ADR为诱导剂,在脑塞患者发病急性期与正常对照组比较都有显著性降低(PADP0.05
2.3 脑梗塞患者血小板GMP-140的含量变化
研究发现脑梗塞发病急性期和稳定期的GMP-140含量无显著性差异(P0.05),但与正常对照组相比均有显著性差异(P0.05)。我们认为脑梗塞时血浆中血小板GMP-140含量的降低,可能是由于NO对血小板抑制作用所致。
总之,通过对脑梗塞急性期和治疗后的稳定期血中NO含量、PAgT和血小板GMP-140水平的检测显示,随着脑梗塞早期血中NO含量的增加,则血小板的聚集功能降低;而稳定期NO含量降低时,则血小板聚集功能即恢复。血小板GMP-140是反映血小板活化和释放功能的标志物,它在NO增高时反而降低,并且在急性期和稳定期之间无显著性变化。由于本研究采用的病例在治疗前及治疗过程中没有使用干扰血小板功能的药物,所以血中NO的增高对血小板的聚集、释放和活化均有抑制作用。充分认识上述血液病理变化并检测血中NO、PAgT、GMP-140的水平,对脑梗塞患者诊断、治疗及预后观察具有重要价值。
参考文献
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