脑源性神经营养因子及新生儿缺氧缺血性脑病探究进展.docVIP

脑源性神经营养因子及新生儿缺氧缺血性脑病探究进展[关键词] 神经营养因子；脑源性；缺血缺氧性脑病；新生儿 [中图分类号] R722.1[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）08（a）-022-03 脑源性神经营养因子(brain derived neuotrophic factor,BDNF)是1982年德国神经生物学家Barde等首次从猪脑中分离纯化出来的一种碱性蛋白质，是神经营养因子（NT）家族中最具代表性的成员之一，对神经系统的多种类型神经元的生长、发育、分化、维护和再生都具有重要作用。近年来有关BDNF的临床应用研究正逐步深入，本文就其与新生儿缺氧缺血性脑病的研究综述如下： 1 BDNF的生物学特性 1.1分子结构与体内分布 1991年Ozcelik等证实人BDNF基因定位于11q13，1989年德国科学家Leibrock等研究表明BDNF基因编码区不存在内含子，属于单一外显子结构。BDNF蛋白分子量13 kDa，等电点（pI）为9.99，主要由两个成熟亚基非共价结合形成的同源二聚体形式存在，平衡超离心研究，即使在蛋白浓度10－10 mol/L也没有发现单体。BDNF蛋白前体含252个氨基酸残基，加工修饰后成为含119个氨基酸残基的成熟亚基。成热BDNF的氨基酸序列高度保守，其3对二硫键位于Cys13～Cys80、Cys58～Cys109、Cys68～Cys111之间，主要由β－折叠和无规则二级结构组成，对BDNF的稳定和功能起重要作用。BDNF成熟区残基序列与NGF比较，肽链长度仅相差1个残基，且超过50％（63个）残基同源，其中包括全部6个半胱氨酸残基和N－乙酰糖基化位点。 BDNF主要由脑组织合成，分布于中枢神经系统的海马、杏仁核和皮质[1]，在海马BDNF mRNA含量较NGF mRNA含量高出20～30倍，也存在于纹状体、基底前脑、丘脑、脑干和小脑。近来发现周围神经系统也有BDNF的合成，卵巢、心、肺、血小板和骨骼肌也有少量表达。 1.2运输方式 传统观点认为NTFs以靶源性方式生成，逆行运输至胞体发挥生物效应。但大量证据表明，神经系统BDNF主要通过旁分泌方式，也可通过自分泌方式与TrkB结合，还存在BDNF的顺行轴突运输过程。Butowt R等[2]利用眼内注射放射性同位素标记的神经营养因子研究表明：视网膜节细胞可顺行运输神经营养因子到中脑上丘，在成年啮齿动物，BDNF的顺行轴突运输过程是由高亲合力受体TrkB介导的。 1.3受体及信号传导 根据神经营养因子受体与NTFs的亲和力的大小，可以分为高亲和力受体和低亲和力受体。 高亲和力受体TrkB，Kd为10－11 mol/L。TrkB是一条单跨膜肽链组成的高度糖基化分子，由821个氨基酸残基组成，分子量为145 kDa，整个分子分成3个结构区：细胞外配体结合区；细胞内酪氨酸蛋白激酶活性区；连接两个区域的跨膜结构。胞外区包括一个由32个氨基酸残基组成的信号肽和富亮氨酸基元（lecuine rich motif，LRM），LRM的侧翼有两个富含胱氦酸簇，后接两个免疫球蛋白样结构域Ig-1和Ig-2，其中一个是结合BDNF所必需的。TrkB是BDNF的功能型受体，是信号转导所必需的。BDNF与TrkB结合使之激活分两步进行，一是配体诱导的受体二聚化，二是胞内区酪氨酸残基的自磷酸化。活化的受体能与多个胞内蛋白质相互作用并使其磷酸化[3]，这些活化的胞内蛋白质进而激活Ras/促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导途径[4]和胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化，使胞内的钙浓度上升，随后激活钙/钙调蛋白依赖性激酶和酪蛋白激酶-2，CREB磷酸化作用[5]，再进一步激活磷脂酰肌醇-3激酶，使信号从胞质传入核内，最后导致基因表达模式的改变包括蛋白质、DNA、RNA等大分子物质的合成，进而引起应答BDNF细胞在生理学和形态学上的改变[6，7]。 低亲和力受体p75NTR，Kd为10－9 mol/L。p75NTR是分子量为75 kDa的跨膜糖蛋自，有一糖基化的胞外部分，包括4个参与配基结合的富胱氨酸簇、跨膜区和一段短的缺乏内在催化活性的胞质序列。其胞外结构区与肿瘤坏死因子受体的结构相同，胞浆结构区具有nmr结构，是死亡信号区。实验证明在无Trk受体存在时，p75NTR有促进细胞凋亡的作用，在Trk受体存在时，p75NTR参与高亲合位点的形成，并增强Trk受体在不同时间、不同组织表达的阶段特异性和组织特异性，在BDNF作用时不是必需的。 1.4生物学功能 BDNF对周围和中枢神经元有广泛的作用，对多种神经元有促进生存、有助分化和再生、增进代谢、增强功能表达及营养、支持、保护