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Chapter 7RNA processing;一、RNA的加工： 将各种前体RNA分子加工成成熟的、有活性的RNA的过程 二、场所： 主要是在细胞核内进行;三、RNA加工的类型： 1、剪切：就是剪去部分序列； 2、剪接：是指剪切后又将某些片段连接起来。 3、末端添加核苷酸：如 tRNA的3′-末端添加-CCA。 4、修饰：在碱基及核糖分子进行化学修饰。 5、RNA编辑：某些RNA，特别是mRNA自DNA模板上所获得的遗传信息，在转录作用后又发生了变化。 ;一、原核生物rRNA的加工 ;1、核糖核蛋白复合体（RNP） 形成 初生转录物形成一些茎环结构，随后与一些蛋白结合形成核糖核蛋白复合体（RNP）;原核生物rRNA的加工;2、甲基化修饰：（通常是A） 甲基供体-- S-腺苷甲硫氨酸 3、剪切： （1）RnaseⅢ剪切释放出5S，16S，23S前体分子； （2）随后RNA酶M5, M 16, M 23分别在每一前体分子的5’端和3’端进行剪切。 ;二、真核细胞rRNA的加工;Mammals;（1）广泛地进行甲基化修饰，主要是在28S及18S中。 （2）除掉外部转录间隔区(ETS)1和2，再切去内部转录间隔区（ITS），释放出32S和20S的两个前RNA。 （3）随后45 S rRNA前体经核酸酶顺序剪切下生成18S、5.8S、28S rRNA。;第三节 tRNA的加工;二、真核tRNA的加工和原核的区别;第四节 前体mRNA的加工;;二、核内不均一RNA（hnRNA）--RNApolⅡ的产物 1、hnRNP： hnRNA+蛋白 前mRNA snRNA 2、snRNP：snRNA+蛋白 功能：参与前mRNA的剪接;三、真核生物前mRNA加工过程;前mRNA加工过程 5’端加帽（5’-capping） 3’端加尾 剪接（splicing） 甲基化修饰（methylation） ;;1、三种5’帽结构形式;2、 5’帽的作用： （1）防止被5’外切核酸酶降解 （2）翻译时可被起始因子和核糖体识别 （3）有助于mRNA越过核膜，进入胞质;3、5-capping: m7G ( 5’-5’, mRNA guanyltransferase鸟苷转移酶) Base 1: 2’-OH 甲基化；A (N6-甲基化) Base 2: 2’-OH 甲基化 ;;（1）mRNA5′末端pppNp在磷酸酶作用下脱Pi，形成ppNp-。 （2）在鸟苷酸转移酶作用下，与Gppp反应形成GpppNp-,连接方式为5‘-5’三磷酸桥。 （3）在甲基转移酶作用下，由腺苷蛋氨酸(SAM)提供甲基，在鸟嘌呤的N-7上甲基化 （4）在连接于鸟苷酸的第一个（或第二个）核苷酸2－OH上又进行甲基化，最后形成m7GpppNmp。 ;（二）3’端加尾;3、3’末端多聚A尾的生成 （1）识别因子识别AAUAAA （2）剪切因子(CF)在加尾位点AAUAAA下游11－ 30nt处剪切RNA； （3）poly(A)聚合酶合成poly(A)尾巴；;第五节 内含子的剪接;3、核酶与传统酶的区别： （1）一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是RNA或 带蛋白的RNA； （2）有的核酶既是催化剂又是底物。而酶仅催化反应;;二、前mRNA的剪接（splicing） （一）前mRNA的内含子　 GU-AG类（主要） AU-AC类（次要） 　;GU-AG类内含子剪接位点的特征： （1）5’剪切点（供体位点）为GU （2）3’剪切点（受体位点）为AG GT-AG rule (GT-AG 规则)：指在核基因内含子开始和结束出现的两个固定的脱氧核苷酸:5＇端为GT, 3＇端为 AG，与前体RNA内含子剪接有关 （3）分支部位： 多聚嘧啶序列：Py80 N Py80 Py87 Pu75 A Py95，;（ 二）剪接体的形成 1、剪接体（spliceosome） 是由几种非特异的小核糖核蛋白(UsnRNP)与mRNA前体结合而成 2、剪接因子 （1）UsnRNPs ：U1、U2、U5、U4/U6 （2）化学组成：U-RNA+proteins U-RNAs(uracil rich RNA)： snRNAs （3）特点：snRNP中的RNA成分与5’端和3