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白芷细胞外cam结合位点的扫描电镜定位研究-河北师范大学学报
1998 12 () Dec. 1998
22 4 Journal of Hebei Normal University( Natural Science) Vol. 22 No. 4
白芷细胞外 aM结合位点
的扫描电镜定位研究
1) 2) 1) 1) 2) 2)
宋春凤 孙大业 刘贵生 李向印 郭 毅 王朝辉
( 1), 050017,; 2), 050016,
;35,,)
( almodulin, aM ) ,
,
, aM .
; aM; ;
Q73
2+
aM a ,
[ 1, 2] [ 3]
. 1984 MacNeil , Biro ,
[4, 5]
aM. .
,21 [6] .,
kd aM BPs
aM, aM
.
1
1. 1 实验材料
1. 1. 1 . MS
,30 / , 2,4 1 / , 6 0. 5 / ,5. 5 / , 5. 8,
g L D mg L BA mg L g L pH
, 250 26± 1℃,7~ 10 1
LRH G d
,9.
1. 1. 2 ( BSA) , N-2-hydroxyethyl piperazine-N -2-ethanesulfonic acide
( HEPES) ,trifluoperazine( T EP) Sigma,calmodulin( aM).
1. 2 植物金标 aM的制备
[7]
1. 2. 1 Frens( 1973) 40nm
[8]
1. 2. 2 Fujimoto( 1989) aM, aM
,,
aM PDE,. PDE
PDE aM, aM
: 1998 03 14;: 1998 04 23
() 22
544
.
1. 3 白芷愈伤组织培养细胞外 aM BPs的扫描电镜胶体金标记
, 1mmol EGT A20mmol/L HEPES
buffer pH7. 22,0. 1ml0. 1ml aM
( 1 20) 1 / 2+ ,,1 ,10 1,
mmol L a h min
1mmol L a/ 2+ 20mmol L HEPES buffer/ 3(10min) , 2. 5%
HEPES buffer ( 4℃) , 20mmol/L HEPES buffer 3 ( 10min) , 1%
4
OsO1h, 50%~ 100% ( 10min) ,2(
30min) ,, IB 3,
, IB 3, S 520.
: ( 1) 1 /
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