转Cry1Ab抗虫基因玉米的分子生物学探究.pdf

TURNCRY1ABINSECT-RESISTANT GENESOFMAIZE0F MOLECULAR BIOLOGYRESEARCH ADissertationSubmittedto theGraduateSchoolofHenanNormal University in of PartialFulfillmentthe Requirements forthe of Degree MasterofScience Chen By Xiaojie Supervisor：Prof．TieShuanggui May，2013 III UlIlllIllllIIIII ⅢPIllIPIII 摘要 Y2290569 玉米(ZeamaysL．)是世界上重要的粮食作物、饲料原料和能源作物，随着世界经济 的持续发展和人口的不断增长，我国对玉米的需求量呈增长趋势。随着环境的同益恶化， 玉米的病虫害越来越重。据FAO统计，每年全世界因虫害造成的玉米损失约占产量的 12％，因此提高玉米单产，培育抗病、抗虫等玉米新品种显得十分迫切。1996年第一例 转基因作物商业化种植后，全球转基因作物种植面积持续增长，2009年达到1．34亿公 顷。目6，J．，作物新品种的培育己由传统的选育逐渐向利用转基因技术培育方向转换。 IIB玉米愈伤组织 本研究通过基因枪介导法将人工改造的CrylAb抗虫基因转入Hi 基因在转录水平上的表达量，探讨了各组织部位的抗虫性与玉米生物学特性之问的关 了转基因玉米和对照玉米植株产量的变化情况，为转基因玉米的育种工作提供依据。 L．：1，并 1、本研究通过基因枪轰击法成功将人工改造CITlAb基因转入玉米愈伤组t一,fl 获得了转基因玉米植株，PCR检测阳性衙为9株；试纸条鉴定Bt蛋白表达的TO代转基 因阳性茁5株；TO代共3株转基因玉米收获种子。 分离规律相比偏小。造成这种现象的原因可能是由于基因枪轰击愈伤组织可引起的拷贝 数多。 高于叶鞘和根部。 4、通过统计分析接虫后转CrylAb基因玉米和对照组玉米心叶期的虫孔数及受害程 度，将转CrylAb基因玉米分为高抗和高感。统计分析接虫后成熟期的玉米植株茎秆和 转Crvl．46抗虫皋I★1]j米的分了生物学1i)i_究 IIB。进一步鉴定了目的性状的有 转CrvlAb基因玉米对玉米螟的抗性显著高于对照Hi 效性，证明日的基因转入玉米植株中，且目的蛋白得到有效表达。 稳定，略有增加趋势，差异不显著(PO．os)。 关键词：玉米，CrylAb基因，抗虫，转基因，分子检测 ABSTRACT Maizeis most the and inthe food，feedstuff world．Withthecontinue