蚓激酶提取工艺以及酶学性质探究.pdf

导师姓名 职称： 马广智 徐杰教授 专 业： 动物学 院 系： 生命科学学院 答辩时间： 2010．5．26 l II I llllll I IIIU LIII IIIII 1 Y176805 Of Specialty： Zoology Col Col lege： ofLifeScience lege Supervisor：ProfessorMaGuangzhi Xu Jie Submitted Date：May26，2010 1)蚓激酶的提取工艺的优化 以赤子爱胜蚓(Eisenia faetida)为原料，采用组织破碎、离心、超滤、二次 硫酸铵盐析、Sephadex 步骤，分离得到蚓激酶(EFE)。酶活力检测采用纤维蛋白平板法，实验过程中对 mol／L 酶提取条件进行优化，选取0．1 pH7．8的磷酸缓冲溶液作为提取缓冲液，在 DEAE离子交换层析，比酶活达42000 U／mg，纯化倍数达到53．8倍，酶活力回 收率为3．7％。经过SDS．PAGE凝胶电泳，其相对分子量约为26kD，含有2个 亚基，每个亚基的相对分子量约为14kD；获得二聚体，得到较高纯度的蚓激酶。 2)提取工艺的成本核算 本实验提取纯化的蚓激酶过程中能耗、成本支出、蚓激酶收益进行成本核 场价12000元／kg为标准，100kg鲜蚯蚓可生产规格为15000U／mg的蚓激酶4．2k 或者规格为20000U／mg的蚓激酶2．46kg，经过成本计算得到毛利润分别为 19962．7元和24282．7元。 3)以提取的蚓激酶为研究对象，对蚓激酶(EFE)的酶学性质和酶的稳定性进 摘要 pH为7．0；在37．55。C，该酶有较好的热稳定性，但是温度高于60C时，酶活迅 7．0．9．0范围内，酶活相对稳定，说明该酶有一定的耐碱性；金属 速降低；在pH Ca2+和 离子H92+对酶活有强烈的抑制作用；而M92+对酶有明显的激活作用； K+对酶活的影响不明显算。 关键词：蚓激酶工艺提取酶学性质成本核算 II the ofits andthecalculationofthecost．the studyoptimizationprocesspurification methodswere in following applied molecula