促红细胞生成素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的抗炎作用.pdfVIP

· 828 · 广东医学 2016年3月第37卷第6期 GuangdongMedicalJournalMar．2016，Vo]．37，No．6 促红细胞生成素对大 鼠肝脏缺血再灌注损伤的 抗炎作用术 陈茂松 ，王军，欧雷 海南医学院附属医院普通外科(海 口570101) 摘【要】 目的 观察促红细胞生成素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的抗炎作用。方法 将雄性sD大鼠随机分 为假手术组、模型组及促红素组。假手术组仅解剖分离肝十二指肠韧带；模型组采用无创血管夹夹闭肝左叶及 中叶 血流 (约70％肝缺血)，缺血时间为45rain；促红素组于缺血前30min门静脉注射促红细胞生成素 (3000Iu／kg)。 采集各组再灌注 1、6、12h血液及肝组织标本。全 自动生化分析仪测定血清ALT、AST；ELISA测定血浆TNF—d、 IL一1蛋白含量；Westernblot免疫印迹检测肝组织NF—KB蛋白表达。结果 与模型组比较，促红素组ALT、AST 水平显著下调 (P0．05)。血浆TNF—Or．和IL一1含量 自再灌注6h明显升高，至 12h达最高；与模型组相比，促 红素组各时间点血浆TNF— 和IL一1含量均明显降低 (P0．05)。再灌注后早期肝内组织NF—KB表达量开始 增加 ，于6h表达最高峰，其后开始下降；与模型组相 比，促红素组各时间点肝组织NF—KB表达量均明显降低 (P0．05)。结论 促红细胞生成素能有效减轻大鼠肝缺血再灌注损伤，其作用机制可能是通过抑制NF—KB的 表达，减少TNF— 、IL一1的释放，从而减轻肝脏缺血再灌注过程中的炎症反应。 【关键词】 促红细胞生成素；大鼠；肝脏缺血再灌注损伤；炎症反应 行复杂的肝脏外科手术时常发生肝脏缺血再灌注 鼠(各时相6只)，经下腔静脉采血，统一取左外叶肝组 损伤，是影响患者术后肝功能恢复及长期存活的重要 织待查。全 自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移 因素。促红细胞生成素是广泛应用于各种贫血的临床 酶 (ALT)、门冬氨酸氨基转移酶 (AST)；ELISA方法测 治疗药物，由于其疗效肯定且不良反应小 ，近年来逐渐 定血浆 TNF一仅、IL一1蛋 白含量 ；Westernblot免疫印 应用于各种器官缺血再灌注损伤的保护作用的实验研 迹检测肝组织NF—KB蛋白表达。 究 ，但就其具体作用机制的研究 比较少见。2014 1．4 统计学方法 采用 SPSS19．0统计软件 ，计量资 年 10月至2015年 10月，本研究通过观察促红细胞生 料采用均数 ±标准差表示，组问比较采用单因素方差 成素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤过程中各种炎性细胞 分析，组间两两比较采用 LSD检验，P0．05表示差异 因子的影响，探讨其发挥保护作用的机制，为临床上肝 有统计学意义。 脏缺血再灌注损伤的防治提供新的思路。 2 结果 1 材料与方法 2．1 各组血清 AIJrr和 AST含量 比较 模 型组血清 1．1 材料和试剂 健康成年 SPF级雄性 SD大 鼠72 ALT和AST含量 自再灌注后 1h开始升高，至 12h达 只，体重250～300g，购于广东省医学实验动物中心 最高。与模型组相 比，促红素组各时间点血清 ALT和 (O094412)，随机分为3组 (n=24)：假手术组 、模型组 AST含量均明显降低 (P0．05)。见表 1。 及促红素组。促红细胞生成素 (哈药集团)，肿瘤坏死 2．2 各组血浆TNF一 和 IL一1含量 比较 再灌注 1h 因子一仪(TNF— )及 白细胞介素一1(IL一1)ELISA试 时各组血浆TNF— 和 IL一1含量无明显差异；模型组