IL10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究.doc

　　IL10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究 ：陈文博，谭长强，董伟达，李玉瑾，蔡文君，郭浪，李王伟 【摘要】 　　目的：探索局部应用IL10基因与慢病毒重组载体对实验性自身免疫性感音神经性聋（ASNHL）的 治疗 作用。方法：采用纯化同种内耳抗原免疫豚鼠，造成ASNHL动物模型，再将重组载体分别经鼓阶、内淋巴囊和圆窗龛局部注射或渗透，观察听觉功能和内耳病理形态学变化，同时行免疫组织化学试验了解慢病毒转染和基因产物在内耳的分布。结果：治疗前后ABRⅢ波阈值的均值对比分析结果显示，各实验组局部基因治疗后均降低；治疗后各实验组组间比较差异无统计学意义。慢病毒主要转染部位是血管纹、Corti器、蜗轴小血管周围及其内淋巴囊等处。基因产物表达部位与转染部位基本相同。结论：重组载体经不同途径均可转导入内耳，并在内耳表达基因产物，对ASNHL发挥有效的治疗作用。 【关键词】 自身免疫性感音神经性聋； 基因治疗； 慢病毒载体 　　［Abstract］ Objective:To evaluate therapeutic effects of transferring rebinant replicationdefective lentiviral vector of interleukin IL10 gene arked into inner ear for locally treating experimental autoimmune sensorineural hearing loss(ASNHL) in guinea pig.Methods:Guinea pigs munized al models of autoimmune sensorineural hearing loss.The experimental groups panic scale,endolymphatic sac and round embrane) for therapy of ASNHL.Before and after gene therapy(7 days),auditory brainstem response (ABR) thresholds ined,and tissue paraffin sections of temporal bone ade and observed by light microscopy and electron microscopy.Immunofluorescence and enzyme immunohistochemistry tests ade for detecting lentiviral transfection and gene product expression.Results:After treatment the mean threshold of ABR Ⅲ ental A,B,C groups loent; and contrasting betainly transferred the psalterial cord,cortiorgan,cochlear axis,vessels and endolymphatic sac,etc. Expressing parts of gene product and thansfering parts e.Conclusion:Rebinant replication defective lentiviral vector can transfer into inner ear through different approaches and generate gene product,and shomunity sensorineural hearing loss; gene therapy; lentiviral vector 　　1979年McCabe通过对部分感音神经性聋患者的临床观察［1］，首先提出自身免疫性感音神经性聋这一概念（autoimmune sensorineural hearing loss,ASNHL），之后许多相关专家和学者对该病进行了大量的实验与临床研究，现已证实，ASNHL是一种临床疾病实体。作为目前极少数可以获得有效治疗的感音神经性聋（SNHL）之一，对其进一步研究工作已成为耳 科学 领域的一个热点。 　　自1996年基因治疗应用于内耳，基因疗法被认为是未来治疗 听力 障碍最有希望的方法之一［2-3］。目前ASNHL治疗方面存在以下问题：激素和免疫抑制剂虽然有效，但需应用较长的时间，可造成不同程度的毒副作用；部分患者听力改善达到一定水平后，继续用药疗效甚微。基因治疗具有一次注射