死亡受体DR5在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义.doc

　　死亡受体DR5在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义 摘 要:目的 探讨死亡受体DR5在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）细胞中的表达及其临床意义. 方法 培养Jurkat，NB4细胞和抽取ANLL患者的骨髓细胞，分离出单个核细胞，用免疫组织化学染色的方法测定DR5的阳性表达率，所选病例进行诱导化疗后，研究DR5的阳性表达率与诱导化疗结果的关系. 结果 DR5的阳性表达率在Jurkat细胞中为98%，阳性物质主要分布在胞质及胞膜中;而在NB4细胞中则为81%.不同ANLL患者的DR5阳性细胞的百分率存在较大的差异，其中最高达94%，最低为45%.ANLL患者的DR5阳性表达率与诱导化疗后骨髓涂片的原始和幼稚细胞比例呈负相关，与诱导化疗后的缓解率呈正相关;DR5的阳性表达率与ANLL分型无明显相关. 结论 该结果对ANLL诱导化疗后的疗效判定有一定的参考价值. 　　Keyia，nonlymphocytic，acute;death domain 　　Abstract:AIM To reveal the expression of death receptor5（DR5）in the cells of acute non-lymphocyte leukemia（ANLL）and its clinical significance.METHODS ANLL cell line Jurkat and NB4cells arromunohis-tochemical staining method.Inducing chemotherapy otherapy results.RESULTS DR5positivity rate ainly located in membrane and cytoplasm，81%in NB4cells，and significantly different in ANLL patients，ranging from94%to45%.DR5positivity rate ary cell to infantilism cell，and posi-tively correlated ission rate after inducing chemotherapy，and ight provide clinical significance for assessing the therapeutic effects of in-ducing chemotherapy for ANLL. 　　0 引言 　　死亡受体（Death Receptor）结构上属于肿瘤坏死因子（TNF）受体超家族成员，是与相应配体结合后可导致死亡受体表达细胞凋亡的一类跨膜受体［1］ ，包括Fas，TNFR1，DR3，DR4，DR5等.DR4与DR5共用的配体 TNF相关的凋亡诱导配体（TRAIL）是新近发现的一类TNF超家族成员.TRAIL可以选择性杀伤突变细胞而不杀伤正常细胞，但必须以和DR结合的方式发挥其特有的功效［2，3］ .其中DR5在正常组织中表达较广泛，如睾丸、卵巢、结肠、小肠，肝、脑、肺、脾和外周血白细胞等均有表达.近来有研究报道DR5在某些肿瘤细胞中有表达，其表达水平可能与瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性有关［4］ ，但在急性白血病中的表达情况尚未见报道.我们就DR5在急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）细胞系和患者肿瘤细胞中的表达及临床意义进行探讨研究. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 白血病细胞株Jurkat，NB4由本科实验室提供.白血病原代细胞取自本院血液科12（男5，女7）例ANLL患者骨髓细胞，患者年龄9～67（平均43±11）岁;M2 1例，M3 6例，M4 1例，M5 1例，M6 2例，M7 1例，正常对照5例.其骨髓细胞按常规制备成单个核细胞.主要试剂:RPMI-1640培养基购自西安华美生物公司，为美国GIBCO公司产品;DR5鼠抗人mAb为第四军医大学西京医院免疫学教研室惠赠;免疫组化SABC Envision试剂盒购自武汉博士德公司，为丹麦DAKO公司产品. 　　1.2 方法 　　1.2.1 ANLL细胞系和培养条件 ANLL细胞系Jurkat，NB4在含有100mL#12539;L-1 胎牛血清、2mmol#12539;L-1 谷氨酰胺的RPMI-1640培养液中、37℃，50mL#12539;L-1 CO2 、饱和湿度下培养，倒置显微镜下观察细胞形态.48～72h传代1次，调整细胞密度为5×108 ～1×109 #12539;L-1 ，实验选用对数生长期细胞. 　　1.2.2 骨髓单个核细胞分离 抽取ANLL患者及正常对照人群骨髓5mL