mB7-H4-Fc在小鼠体内表达的实验性研究.pdfVIP

重庆医学 2016年 2月第 45卷第5期 595 论著 ·基础研究 doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2016．05．006 pcDNA3．1／mB7一H4一Fc在小鼠体 内表达的实验性研究 肖 欢 ，潘卫 民 ，王超群。，陈鸿颜 ，徐军发。 (1．海南医学院附属医院核医学教研室，海南海口570102；2．海南医学院附属医院核医学科， 海南海 口570102；3．广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808) [摘要] 目的 获得重组pcDNA3．1／mB7一H4一Fc在肝 内的高效稳定表达。方法 采用流体动力法将表达mB7一H4一hlg融 合蛋 白的真核表达栽体输注小鼠体 内，通过酶联免疫吸附测定 (ELlSA)和实时定量PCR(RT-PCR)的方法，定量检测pcDNA3．1／ mB7一H4一Fc在小鼠体 的内表达。结果 经尾静脉注射的pcDNA3．1／mB7一H4-Fc能在肝组织 中稳定表达 ，左 48h时间点分泌的 量达到最高，最大量约 120ng／mL。结论 成功将 pcDNA3．1／mB7-H4一Fc表达栽体导入 了小鼠肝脏 ，并获得 了pcDNA3．1／mB7一 H4一Fc在肝 内的高效稳定表达。 [关键词] B7一H4；pcDNA3．1／mB7一H4一Fc；流体动力学 [中图分类号] R392．12 [文献标识码] A [文章编号] 1671—8348(2016)05—0595—03 ExperimentalstudyofpcDNA3．1／mB7。H4-Fcexpressionofmiceinvivo XiaoHuan ，PanWeimin ，WangChaoqun。，ChenHongyan ，XuJunfa。 (1．TeachingandResearchingSectionofNuclearMedicine；2．DepartmentofNuclearMedicine—Affiliated HospitalofHainanMedicalCollege，Haikou，Hainan570102，China；3．GuangdongProvi~cial KeyLaboratoryofMedicalMolecularDiagnosis，Dongguan，Guangdong523808) [Abstract] Objective ToobtainefficientandstableexpressionofrecombinationpcDNA3．1／mB7一H4一Fcinliver．Methods TheeukaryoticexpressionvectorforexpressingmB7一H4fusionproteinwasinfusedintothemousebodybyadoptingthehydrody- namicmethod．ELISAandreal—timeRT-PCRwereusedtoquantitativelydetectthepcDNA3．1／mB7一H4一Fcexpressioninmouse。 Results ThepcDNA3．1／mB7-H4-Fcbyviatailveininjectioncouldbestablyexpressedinlivertissue，whichreachedthehigheatat timepointof48h。themaximalamountwasabout12Ong／mL．Conclusion ThepeDNA3．1／mB7一H4一Fcex~)ressionvectorissue- cessfullyguidedintothemouseliverandefficientandstableexpressionofpcDNA3．1／mB7一H4一FcinliverI‘obtained． [Keywords] B7一H4；PcDNA3．1／mB7一H4一Fc；hydrodynamics—basedprocedure B7一H4_1]分子 自发现 以来一直被公认为是 T细胞活化