microRNA-141在结肠癌中的表达分析研究.pdfVIP

225O 重庆医学2015年 6月第44卷第 16期 · 经验交流 · doi：10。3969／j．issn．1671—8348．2015．16．032 microRNA一141在结肠癌 中的表达分析研究 王亚南 。，陈昭华 ，陈卫 昌 (1．苏州大学附属第一医院消化 内科 215006，2．苏州市立 医院本部 ／ 南京 医科大学附属苏州医院本部检验科 215002) [摘要] 目的 分析microRNA141(miR-141)在结肠癌组织中的表达及意义。方法 采用荧光定量 PCR(SYBRGreen)法 检测48例结肠癌组织和对应癌旁正常组织中miR-141的表达。结果 miR一141在结肠癌组织中的相对表达量为 5．19土0．52，与 对应癌旁正常组织 1．O1土0．13比较差异有统计学意义(PO．05)；随着结肠癌分化程度的降低结肠癌组织中miR-141的表达增 高；miR一141在淋巴结转移组的相对表达量为 6．O5土0．14，在淋巴结无转移组中为4．3O±0．23，差异有统计学意义 (PO．05)。 结论 miR-141高表达可能与结肠癌的分化程度和淋巴结有无转移有关。miR-141的出现为结肠癌的研究提供 了新的切入点。 [关键词] 结肠肿瘤；微小RNA一141；实时PCR [中图分类号] R735．35 [文献标识码] B [文章编号] 1671—8348(2015)16—2250—03 microRNA(miR)是一类新发现的非编码小 RNA分子 ，通 一 链 cDNA 2．0ffL，50×ROX ReferenceDye1．6 “L，ddH2O 常在转录后水平调控基因表达 。结肠癌的形成是一个多基 因、 5．6 L。扩增程序 ：94℃预变性 2min；94℃ 20S，60℃ 34S， 多阶段、长期复杂的过程。至今 ，在人类基因组中已发现 1000 43个循环 。 多个 miRl1]，它们广泛参与器官发育、肿瘤发生、细胞增殖分化 1．4 结果计算 所有反应设立 3个复孑L，记录每个反应管 中 以及细胞凋亡等生理过程 ]。miR一141是 miR一200家族 中的 的荧光信号到达所设定的阈值时所经历的循环数 (Ct值)，以 一 员 ，是一种具有上皮组织细胞特异性 的微小 RNA_4]。本文 miR一16作为内参照，对 目标基 因进行归一化处理，以确保相等 采用实时定量 (real—time)PCR技术检测 miR一141在结肠癌组 数量 的样 品中比较 目标基 因的量 。采用定量 PCR中的相对定 织和相对应癌旁正常组织中的表达情况，分析其与各临床病理 量法 ，表达量 倍数 的变 化用 F一2 △c法 计算 。△ACt一 参数之间的关 系，探索 miR一141在结肠癌 中的表达 ，为研究 (Ct。R_14l—Ct。K-l6)结肠癌组织一(CtR_14l—CtR_16)癌旁组织。 miR一141在结肠癌中的作用提供前期科学数据。 1．5 统计学处理 采用 SPSS17．0软件进行统计分析 ，采用 1 资料与方法 单样本 Kolmogorov—Smirnov检验法作数据正态分布检验 ，符 1．1 一般资料 收集苏州市立医院本部 2011年 6月至 2012 合正态性分布计量资料采用 ±S表示，比较采用成组设计的 年 1O月 f48例住院的结肠癌患者，其中男22例，女26例，平均 两样本 t检验 ，多组数据的比较采用单因素方差分析 。以P 年龄 61．2岁，均未经任何手术治疗 以及放、化疗 ，均经病理确 0．05为差异有统计学意义 。 诊。本研究经过院伦理委员会 同意并签署患者知情 同意书 。 2 结 果 取组织标本离体后 10rain内置于液氮罐 内迅速冷冻后置 2．1 结肠癌组织中miR一141和 miR 16PCR产物 电泳结果 一