Notch1和 HES1在骨肉瘤组织中的表达及其对 U2 OS 细胞侵袭能力的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Nov． 2015 Vo1．50 No．6 · 777 · doi：10．13705／j．issn．1671—6825．2015．06．012 Notch1和 HES1在骨 肉瘤组织 中的表达及其对 U2oS细胞侵 袭能力的影响 王 勇，赵 伟，马 骥# 沈 阳医学 院附属 中心医院骨四科 沈阳 110024 择通信作者 ，男，1962年 11月生 ，硕士，副教授 ，研究方 向：骨肉瘤发生发展的基础研究，E—mail：majjil119@163．corn 关键词 Notch1；HES1；骨肉瘤 ；侵袭 中图分类号 R738．7 摘要 目的：研究Notchl和 HES1基 因在骨 肉瘤组织及骨 肉瘤细胞系 U2OS中的表达及其对 U20S侵袭能力 的影响。方法 ：组织学水平研究中，配对选取 23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本 ；细胞学水平研究中，选 取骨 肉瘤细胞系 U20S及人正常成骨细胞系 hFOB1．19；采用免疫组化法检测组织学水平 Notehl及 HES1蛋白的表 达 ，采用 Westernblot及 Real—timePCR法检测组织学及细胞学水平 Notchl、HES1蛋 白及 mRNA的表达。用 Notchl— siRNA沉默 U20S细胞中Notchl基因后 ，应用 Westernblot及 Real—timePCR法检测 U2OS细胞 中Notchl及 HES1的 表达 ，Transwell法检测 U2OS侵袭能力的变化 。结果：相 比于正常组织，骨肉瘤组织 中Notchl、HES1mRNA和蛋 白 呈高表达 (t =22．567，14．830和 8．439，7．100，P0．001)。U2OS细胞 中Notchl、HES1mRNA和蛋 白表达强于 hFOB1．19细胞 (t=11．053，20．482和 28．845，34．681，P0．001)。沉默 Notchl基 因后 ，U2OS细胞 Notch1、HES1 mRNA和蛋 白表达下降(t=6．294，9．209和9．151，13．953，P0．05)，侵袭能力下降(t=71．387，P0．001)。结论： Notch1和 HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达 ，沉默 Notchl基因可降低 U2OS细胞侵袭能力 。 ExpressionsofNotchlandHES1inosteosarcomatissueandtheireffects oninvasionabilityofosteosarcomacellU2OS WANGYong，ZHAO Wei，MAJi The4thDepartmentofOrthopaedics，theAffiliatedCentralHospital，ShenyangMedicalCollege，Shenyang J10024 Keywords Notchl；HES1；osteosarcoma；invasion Abstract Aim ：ToinvestigatetheexpressionsofNotchlandHES1genein osteosarcomatissueandtheireffectson invasionabilityofosteosarcomacellU2OS．Methods：Twenty—threematchedtissuespecimensofosteosarcomaandmatched para—tumornormaltissue，andosteosarcomacelllineU2OSandhumanosteoblastcelllinehFOB1．19werechosen．Theex— pressionsofNotchlandHES1mRNA andprotein in tissue specimensweredetectedby immunohistoehemistry，Real—time PCR andW esternblot．TheexpressionsofNotehlandHES1mRNA andproteininhFOB1．19，U20S，andU2OStransfect—