pvdQ基因对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响.pdfVIP

第 4O卷第 2期第 147页 华 中科技大学学报 (医学版 ) Vo1．40 No．2 P．147 201】年 4月 A ctaM edUnivSciTechnolHuazhong Apt． 2011 - pvdO基因对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响x- 王丽丽 ， 龚凤云， 谢旭华 ， 夏 超 ， 陈 佳 ， 宋 莹， 申爱霞， 邢铭友， 许 东， 宋建新△ 华 巾科技大学 同济 医学 院附属 同济 医院感染科 ，武汉 430030 摘要 ：目的 观察 pvdQ(PA2385)基 因对铜绿假单胞菌生物膜形成 的影 响。方法 构建 pvdQ基 因表达质粒 pME6032pvdQ，鉴定后 ，采用电穿孔法将其转入 PAO1野生株 中，构建 pvdQ 高表达株。同时将 空质粒 pME6032采用 电穿孔法转入 PA()1野生株 中，构建 pME6032空质粒株 ，采用 Real—timePCR检测各株 pvdQmRNA 的表达 。采用结晶 紫染色法 ，观察 PA01野生株 、pvdQ 高表达株和 pvdQ突变株培养 24、48和 72h时生物膜 的生长情况 。结果 Real— timePCR证实成功构建 pvdQ高表达株 。结 晶紫染色的结果显示 ：培养 24h时 PAO1野生株 、pvdQ 高表达株和 pvdQ 突变株形成的生物膜厚度差异无统计学意义 (P20．05)；培养 48h和 72h时与 PAO1野生株 比较 ，pvdQ高表达株生物 膜明显变薄(PO．05)。pvdQ突变株生物膜明显增厚 (P0．05)。结论 铜绿假单胞菌 PAO1野生株 、pvdQ突变株和 pvdQ高表达株体外形成生物膜 的能力有显著性差异，pvdQ基因可能影响铜绿假单胞菌体外形成生物膜 的能力 。 关键词 ：铜绿假单胞菌； 群体感应系统； pvdQ基因； 生物膜 中图分类号 ：R379．9 DOI：10．3870／j．issn2O¨．02．005 EffectsofpvdQGeneonPseudomonasaeruginosaBiofiim Formation WangIili。GongFengyun。XieXuhuaet“ 1)epartmentoJ’InfectiousDiseases，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege， HuazhongUniversityo／Scien(’eandTechnology，Wuhan430030，China Abstract Ohiective To investigatetheeffectsofpvdQ (PA2385)geneon Pseudomonasaeruginosa biofilm forma— tion．Methods TheplasmidpME6032containingpvdQ genewasconstructedandidentified。thentransformedintoPseudomonas aeruginosaPA()1wildtypebyusingtheeIectroporation，building pvdQ overexpressionstrain(pME6032一pvdQ)．Byusing the samemethod，thePA01pME6032 strain wasconstructed．Theexpression ofpvdQ mRNA wasdeteded by using real—time PCR．Biofilm formationwasquantifiedbyusing crystalviolet(CV)assay．andbi