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华中科技大学同济医学院 2003级博士论文
缺氧诱导因子2Q对肝癌细胞生物学行为的影响
中文摘要
induciblefactor2
本文旨在研究缺氧诱导因子一2d(hypoxia alpha，
HIF一2
o)mRNA和蛋白在肝癌组织中的定性和定量表达，及其与肝癌组织临床病
理指标的相关关系，探讨其在肝癌组织中表达的临床意义：通过检测并比较缺氧
状态下肝癌sMMC一7721细胞中HIF一1o和HIF-2U在不同时相的mRNA和蛋白量以
l 2
及两者的半衰期，探讨H1Fa和HIFa的时相差异表达意义及其可能的调节
机制；并通过阻断HIF一2o在肝癌S删c一7721细胞中的表达，研究HIF一2n对肿
瘤细胞生长、黏附和侵袭能力的影响。
笫一部分
HIF一1Ⅱ和HIF一2a在肝痛细胞中的时相差异表达
a结构功能相似却不可相互替代：
目的：缺氧爵导因子2a与缺氧诱导凶子1
n
两者在缺氧过程中的表达不一致。本研究在检测缺氧状态下肝癌细胞中HIF一2
和HTF一1a的时相表达差异并探讨其可能的调节机制和意义。
7721细胞中
方法：以1％低氧培养箱模拟细胞低氧环境，检测人肝癌SMMC
HIF一1 a(naturalantisense
a和HIF一2ⅡmRNA量和蛋白量，以及反义HIF—l
factor一1
inducible a．aHIF)的mRNA量。同时应用氯化钻(CoCl2)和
hypoxia
a
zole—l—beta a和HIF一2
d—ribofuranoslde，DRB)检测HIF一1mRNA的半衰期，
o
评价HIF一1o和HIF一2mRNA的稳定性。
结果：急性缺氧迅速诱导HIF—lⅡ蛋白}HHIF一20蛋白在细胞内堆积。随着缺
华中科技大学同济医学院 2003级博士沦文
o
氧时间延长HIF-IⅡmRNA的稳定性下降，其蛋白表达降低，而HIF一2mRNA转录
和蛋白表达以及aHIFmRNA持续增高。
结论：在较长时相的缺氧过程中，针对于肿瘤细胞对缺氧的适应性调节，以
o可能kIiHIF一1
及在肿瘤的放疗和化疗抗性以及与肿瘤侵袭和转移方面，HIF一2
n
o起着更为重要的作用。aHIF参与]’。HIF一1mRNA的负反馈调节。
a，
关键词：缺氧诱导因子ia，缺氧诱导因子一2a，反义缺氧诱导因子l
肝癌
第二部分
HIF-2o在肝癌组织中的表达及其临床意义
目的：研究缺氧诱导因子2a(HIF2Ⅱ)mRNA及蛋自在
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