转染LKB 1基因乳腺癌细胞与胚胎发育 信号通路及cAMP／PKA通路的关系.pdfVIP

里 据 医学版 复 亏 Sci 20…11N。v，’38(、6) 485 Fudan Univ J Med 转染LKB1基因乳腺癌细胞与胚胎发育 信号通路及 cAMP／PKA通路的关系 成小林 李正东 蒋蓓琦 庄志月1地 庄传经 ( 同济大学附属第一妇婴保健 院乳腺外科 上海 200040；。复旦大学 附属肿瘤 医院乳腺科 上海 200032) 【摘要】 目的 探讨抑癌基因LKB1与胚胎发育 (SonicHedgehog，SHH)信号通路、 ／PKA信号通路之间的相 互关系 。方法 抑癌基因 LKB1转染人乳腺癌细胞 MDA-MB-231，分 MDA-MB-231组 (231组)和转染 LKB1基 因 的MDA-MB-231(LKB1组)两组，每组分别采用 0、5X10一、1X10一、2X10 mol／L等4种浓度的SHH信号通路抑 制剂环靶明(cyclopamine)作用于细胞，各小组细胞分别用RT-PCR法和Westernblot法检测 SHH信号通路相关基 因SHH、Smo的mRNA表达水平和蛋白表达水平，用 cAMP、PKA试剂盒检测 cAMP、PKA数值水平。结果 LKB1 组的细胞通过不同剂量环靶明抑制后，SHH信号通路相关基因SHH、Smo的mRNA和蛋白表达水平相应较 231组 明显抑制 ，且与环靶明剂量呈正相关，抑制效果在环靶 明浓度为 10X10 mol／L时最 明显，继续增加环靶 明浓度到 20×10～mol／L，抑制效果保持不变。231组和 LKB1组中细胞的PKA和cAMP数值均随环靶明浓度增加而增高， 至 10X10 mol／L时达到最高，继续增加环靶明浓度到20×10～mol／L，两组中的PKA和 数值保持不变。在 相 同环靶明浓度下，LKB1组中PI诅 和 cAMP数值高于231组中相应数值 结论 抑癌基 因LKB1协 同环靶明抑 制乳腺癌 M 231细胞的SHH信号通路 的同时亦协 同增加 ／PKA信号通路 的表达，且在环靶 明浓度为 10X10 mol／L时效果最明显；推测存在 LKB1一SHI{．cAMP／PKA通路。 【关键词】 LKB1基因； 胚胎发育信号通路； cAMP／PKA信号通路 ； 乳腺癌 【中图分类号】 R739．9 【文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1672—8467．2011．06．004 Interactionsbetween theSonicHedgehogsignalingpathwayand thecAMP／PKAsignalingpathwayinLKB1 transfectedbreastcancercells CHENGXiao—lin ，LIZheng—dong ，JIANGBei．Qi，ZHUANGZhi—gangA，ZHUANGChuan．jing (DeparmentofBreastSurgery，ShanghaiFirstMaternityandInfantHealthHospital，TongjiUniversity， Shanghai200040，China；DeparmentofBreastSurgery，FudanUniversity ShanghaiCancerCenter，Shanghai200032，China) [Abstract] Objective ToinvestigatetheinteractionsbetweentheL船 1tumorsuppressor，theSonic Hedgehog(SHH)signalingpathwayandthecAMP／PKA signalingpathway． Methods TheLKB1 genewasreintroducedintoMDA．MB．231b