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高中生物实验试剂使用研究
高中生物实验试剂使用研究生物学是以实验为基础的一门自然科学,实验是培养学生科学思想、方法、态度和创新精神的重要手段。在高中生物实验教学过程中,我们经常发现不少学生只重视实验结果,不重视结果的分析;只满足于实验的成功,而不愿对实验失败的原因进行分析。造成这种现象的原因,除了学生对实验的根本目的缺乏深刻的认识之外,不懂得如何分析实验、没有掌握实验分析的一般方法是非常重要的因素。本文从实验试剂方面对实验进行分析。
一、实验试剂及用途
1.0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,用于探究植物细胞的吸水和失水。
2.2%的新配置的淀粉酶溶液、3%的可溶性淀粉溶液:用于探究影响酶活性的条件。
3.3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁、20%的肝脏研磨液:用于比较过氧化氢在不同条件下的分解。
4.Na2HPO4/KH2PO4:酸碱缓冲对,用于实验:生物体维持pH稳定的机制。
5.层析液:用于叶绿体中色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。
6.碘液:遇淀粉变蓝,用于鉴定淀粉的存在。
7.二氧化硅:在叶绿体中色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。
8.斐林试剂:斐林试剂用于生物组织中还原糖的鉴定,将新配置的斐林试剂加入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
9.卡诺氏液:用于低温诱导植物染色体数目的变化,能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。
10.龙胆紫溶液:染色体容易被碱性染液着色,龙胆紫溶液将染色体染成深蓝色。
11.氯化钙:增强细菌细胞壁的通透性,可用于基因工程。
12.氯化钠溶液:浓度为0.9%时可作为生理盐水,用于观察DNA和RNA在细胞中的分布。
13.秋水仙素:人工诱导多倍体试剂,用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍。
14.石蕊试剂:检验溶液酸碱性,用于判断光合速率与呼吸速率快慢的关系。
15.双缩脲试剂:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀,如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
16.苏丹Ⅲ染液:苏丹Ⅲ易溶于脂肪和酒精,从而使脂肪呈现橘黄色,用于检测脂肪,可将脂肪染成橘黄色。
17.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。
18.溴麝香草酚蓝水溶液:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。
19.盐酸溶液:5%的盐酸用于探究影响酶活性的条件;8%的盐酸,用于观察DNA和RNA在细胞中的分布;15%的盐酸用于配置解离液。
20.吲哚乙酸(或2,4-D或α-萘乙酸):吲哚乙酸及植物激素中的生长素,2,4-D或α-萘乙酸则为生长素类似物,用于探索生长素类似物促进扦插枝条生根的最适浓度。
21.重铬酸钾:橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生化学反应,在酸性条件下,变成灰绿色,可以检测酵母菌培养中酒精的产生情况。
二、实验试剂使用时注意事项
1.关于使用方法。有些试剂是多种试剂的混合液,不能长时间放置,这些试剂一般要现配现用,对于这些试剂,使用方法至关重要。比如斐林试剂:由甲液和乙液构成,它可用于鉴定可溶性还原糖。应用原理是甲液乙液混合后产生的絮状与还原糖发生氧化还原反应,产生砖红色Cu2O沉淀。因为Cu(OH)2容易沉淀,所以使用菲林试剂时,要现配现用,即将甲液和乙液先混合,再加入待鉴定的溶液中。再如双缩脲试剂:由A液和B液构成,它可用于鉴定蛋白质。应用的原理是在强碱的环境中蛋白质能发生反应,形成紫色的络合物。因此,要先往蛋白质溶液中加入A液,营造一个强碱环境,然后加入B液,提供Cu2+,所以使用双缩脲时要分别加入,即先加入A液,再加入B液。
2.关于试剂用量。有些实验对药品与试剂的量有一定的要求,如实验“绿叶中色素的提取和分离”中,无水乙醇、层析液的量就要控制好:提取5g叶片中的色素,用10mL无水乙醇是适中的,若无水乙醇过多,会使色素浓度降低,减少滤纸条上色素的量,使分离效果不明显;若无水乙醇少了,色素提取又不充分。
3.关于试剂浓度。实验中规定的浓度,都是人们经过多次试验后,认为最适合的。实验员在实验前配制药品与试剂时,浓度要配准,否则将会影响学生实验。如实验“观察植物细胞的质壁分离和复原”中蔗糖溶液浓度较高时(高于0.3g/mL),会使细胞因发生强烈质壁分离而失水过多,细胞死亡,不能复原。
学会对实验试剂进行分析,弄清每个实验用到的每一种实验试剂,掌握每种试剂在实验中的作用、反应原理以及与整个实验原理的联系,是实验取得成功的有力保证。
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