Agilent_6410串联质谱培训.docVIP

Agilent 6410串联质谱的组成、原理简述 质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。 质谱的特点 Ⅰ 进样系统-1200液相系统组成(LC-1200 Autosampler)；柱温箱(Oven)。 泵状态指示灯 黄色：说明未准备就绪。在等待达到或完成一个特殊条件，或正在运行自测程序。 红色：为出错状态，说明已检测到一个影响正常操作的内部问题。通常，出错情况需要加以注意(例如，渗漏，不合格的内部元件等产生的出错情况)，出错情况常会干扰分析。 闪烁黄色：表明组件处于驻留状态。 闪烁红色：说明组件启动过程中出现严重错误。 Ⅱ 质谱部分 1、毛细管 —— 增加去溶剂化，从而使化学噪声最小。 2、skimmer与八极杆 —— 高效率的离子捕获，使宽质量带宽离子传输最大化。 3、lens1和lens2 —— 大大提高高质量离子的传输。 4、四极杆1（MS1）——双曲线的四极杆优化离子传输和质谱分辨率。 5、RF四极杆段 ——增强离子进出碰撞池时的传输。 碰撞池 —— 高压具有线性加速度的碰撞池优化质谱/质谱分裂，从而在一个短的 停留时间仍可消除交叉干扰。六极杆设计有助于捕获碎片离子。 四极杆2（MS2） ——双曲线的四极杆优化离子传输和质谱分辨率。 打拿极 —— 允许快速电极转换，高增益，寿命长，噪音低。离轴设计允许中性物质穿过而不会碰到检测器 。 电子倍增器 ——寿命长，因为离子从不接触其表面，只有电子接触。 一、ESI源 样品溶液中发生静电喷雾，在干燥气流中（大气压下），形成带电雾滴，随着溶剂的蒸发，通过离子蒸发等机制，生成气态离子。 1. 通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子，由于质谱仪测定质/荷比，因此质量范围只有几千质量数的质谱仪可测定质量数十几万的生物大分子。 2. 电喷雾电离是最软的电离技术，通常只产生分子离子峰，因此可直接测定混合物，并可测定热不稳定的极性化合物；其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子；通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID）测定化合物结构。 直角喷雾离子源产生最大的离子化效率。 高电压电极：毛细管帽、半圆形电极和对电极和喷雾挡盖组成。 注意：1. 喷雾针不带电，透镜部件带负压（正离子模式），透镜部件带正压（负离子模式） 二、前端离子光学组件 毛细管：内径0.6mm，毛细管电压值取决于毛细管电压设置、溶剂流速和溶剂导电性。 毛细管电流真实反映离子流的状态。 毛细管电流小，离子化效率低，表明雾化效果不好。使用时间长或清洗不足，毛细管顶端残留物增加，形成绝缘层，减少了ESI操作时所必需的电场能量，降低灵敏度和信号稳定性。进一步，毛细管内壁污染，降低离子传输，特别是低质量离子，污染再严重，可能从高电压端（进口）到低电压端（出口）产生泄漏电流，这会导致毛细管电流增加并产生波动的毛细管电流。 ESI离子形成的过程： ①溶液中的电离：样品的pKa 和溶液的pH ②喷雾：表面张力和粘度；气动辅助 ③形成带电小液滴：由于毛细管被加高压，造成氧化还原反应，形成带电液滴。 ④去溶剂：溶剂蒸发和小液滴碎裂：溶剂蒸发，离子向液滴表面移动，液滴表面的离子密 度越来越大，当达到Rayleigh (瑞利）极限时，即液滴表面电荷产生的库仑排斥力于液滴表面的张力大致相等时，液滴会非均匀破裂，分裂成更小的液滴，在质量和电荷重新分配后，更小的液滴进入稳定态，然后再重复蒸发、电荷过剩和液滴分裂这一系列过程 ⑤形成气相离子：被分析的样品在溶液中电离成离子，在大气压下，强电场和雾化气使样品雾化变成小的液滴并带电，强电场进一步使被分析物解离，加热的干燥气使液滴中溶剂蒸发，液滴缩小，表面电荷增加，对于半径10nm的液滴, 液滴表面形成的电场足够强，离子间的排斥力超过凝聚力，发生库伦爆炸，最终导致部分离子从液滴表面蒸发出来，而不是液滴的分裂，最终样品以单电荷或多电荷离子的形式从溶液中转移至气相，形成了气相离子，通过毛细管进入质谱。 lens1： 电子静态透镜：聚焦离子。 lens2： 上施加一个RF电压，使四极杆和透镜2有相同频率，以便离子进入四极杆区域。 八极杆射频离子向导：一个对于离子束的非常有效的聚焦单元。 三、第一组四级杆（MS1） 四极杆分析器及其特点：因其由四根平行的棒状电极组成而得名。离子束在与棒状电极平行的轴上聚焦，一个直流固定电压（DC）和一个射频电压（RF）作用在棒状电极上，两对电极之间的电位