炮制延胡索对延胡索乙素及去氢紫堇碱含量影响.doc

炮制延胡索对延胡索乙素及去氢紫堇碱含量影响摘要：目的考察炮制延胡索对其生物碱含量的影响。方法用HPLC测定生品、酒炙与醋炙延胡索中延胡索乙素和去氢紫堇碱的含量。结果延胡索乙素和去氢紫堇碱分别在26.35~316.2μg/mL（r＝0.999 9）和10.32 ～123.84μg/mL（r＝0.999 9）范围内具有良好的线性关系。结论延胡索乙素在醋炙品中的含量最高，去氢紫堇碱则在生品中的含量最高。 关键词：延胡索；炮制；延胡索乙素；去氢紫堇碱 中图分类号：R282.71文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)08-0001-02 延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuoW.T.Wang 的干燥块茎，始载于宋代《开宝本草》。本品味辛、苦、性温，归肝脾经，多用于胸胁、脘腹疼痛，经闭痛经，产后瘀阻，跌打损伤等证。延胡索多以炮制品入药，其炮制方法有炒制、蒸制、煮制等多种。现对延胡索不同炮制品中镇痛有效成分延胡索乙素和治疗冠心病有效成分去氢紫堇碱的含量进行分析比较[1]。 1仪器与试药 1.1仪器 2695-2996型高效液相色谱仪（Waters）；AY120 分析天平（Shimadzu）。 1.2试药 延胡索药材（广州市药材公司）；延胡索乙素（批号：0726-200107，中国药品生物制品检定所）；去氢紫堇碱（纯度99%，伊普瑞斯科技有限公司）；乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯；黄酒（四川巨龙食品有限公司）；陈醋（广州市番禺新造公司）。 2方法与结果 2.1药材炮制 取延胡索药材，除去杂质，洗净， 80 ℃烘干，捣碎成粗颗粒，过筛去除细粉，分别用不同辅料炮制[2]。 醋炙品：称取延胡索生品粗颗粒100 g，量取陈醋20 mL，加水稀释至40 mL，与药材拌匀闷润至醋液吸尽，于热锅中文火炒干，备用。 酒炙品：称取延胡索生品粗颗粒100 g，量取黄酒15 mL，加水稀释至40 mL，与药材拌匀闷润至黄酒吸尽，于热锅中文火炒干，备用。 2.2延胡索乙素含量测定[3] 2.2.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18（200 mm ×4.6 mm，5μm），流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH为6.0）55：45，流速1.0 mL/min，柱温25 ℃，检测波长280 nm，进样量20μL。 2.2.2对照品溶液制备精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.527 mg的溶液。 2.2.3供试品溶液制备分别取生品、醋炙品、酒炙品粉碎，过3号筛，约1 g ，平行精密称定3份，置锥形瓶中精密加入氨水-甲醇试液（1：20）50 mL，称重，超声提取30 min，放冷称重，用氨水-甲醇试液补足减失重量，精密量取续滤液25 mL 置入蒸发皿，水浴蒸干，加甲醇定容至10 mL备用。 2.2.4线性关系考察精密量取对照品溶液 0.5，1，2，4，6 mL 至10 mL量瓶，甲醇定容至刻度，注入液相色谱仪，测定延胡索乙素吸收峰峰面积，以峰面积对浓度作线性回归，得线性方程为y＝20 769x－85 694，r=0.999 9，线性范围为26.35～316.2μg/mL。 2.2.5稳定性考察取供试品溶液，每隔2 h进样1次，12 h 内样品稳定性良好，RSD为1.37%。 2.2.6样品含量测定取各供试品溶液，注入液相色谱仪，测定不同炮制品中延胡索乙素的平均含量。得生品 0.061%，酒炙品0.068%，醋炙品0.089。 2.3去氢紫堇碱的含量测定[4，5] 2.3.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18(200 mm ×4.6 mm，5μm)，流动相：乙腈-0.03 mol/L磷酸二氢钠30：70，检测波长340 nm，柱温25 ℃，流速1 mL/min，进样量10μL。 2.3.2对照品溶液制备精密称取去氢紫堇碱对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.206 4 mg的溶液。 2.3.3供试品溶液制备分别取生品、醋炙品、酒炙品粉碎，过3号筛，约1 g ，平行精密称定3份，按2.2.3项方法操作。 2.3.4线性关系考察精密量取对照品溶液各 0.5，1，2，4，6 mL 至10 mL量瓶，甲醇定容至刻度，注入液相色谱仪，测定去氢紫堇碱吸收峰峰面积，以峰面积对浓度作线性回归，得线性方程为y＝146 821x＋233 602，r =0.999 9，线性范围为10.32 ~123.84μg/mL。 2.3.5稳定性考察取供试品溶液，每隔2 h进样1次，12 h 内样品稳定性良好，RSD为 3.56%。 2.3.6样品含量测定取各供试品溶液，