针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠LPL HL及肝细胞脂肪变性效应比较.docVIP

针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠LPL HL及肝细胞脂肪变性效应比较摘要：目的：研究针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠血清脂蛋白代谢酶及肝脏组织细胞脂肪变性的影响作用及其效应差别。方法：采用高脂饮食饲料喂养造成高脂血症大鼠模型。将柏只sD大鼠随机分为空白组、模型组、丰隆单穴组和丰隆配穴组，每组10只。空白组每天给予基础饲料喂养，其余3组每天给予高脂饲料喂养。造模第15天给予丰隆单穴组、丰隆配穴组针刺治疗。治疗5周后，所有大鼠腹腔静脉取血检测LPL、HL。摘取肝脏进行油红“0”染色。结果：丰隆单穴组、丰隆配穴组的ulL、HL均明显高于模型组，有极显著性差异(P0.05)。丰隆单穴组和丰隆配穴组均比模型组脂肪细胞小、数量少、染色浅。丰隆配穴组的肝组织脂肪细胞明显比丰隆单穴组染色浅，密度相对小。结论：钟刺丰隆单穴或丰隆、关元、内关3穴合用均可提高高脂血症大鼠血清lPL、HL的活性，催化tG水解，二者作用的差异不显著。针刺丰隆单穴或丰隆、关元、内关3穴合用均可减轻肝细胞内脂肪的堆积，对肝脏组织细胞脂肪变性具有一定的改善作用。其中，针刺丰隆、关元、内关3穴的效果优于丰隆单穴，能更好的调控肝脏脂质代谢。 关键词：丰隆；高脂血症；针刺；lpL；HL 中图分类号：R－33 文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2008)01－0082－03 近年来，随着人们生活水平的提高，高脂血症的发病率明显上升。临床流行病学调查认为，高脂血症是动脉粥样硬化形成的主要危险因素之一，同时也与脂肪肝、高血压、糖尿病、心脑血管病关系密切。大量的临床研究证明，针灸对高脂血症有良好的治疗作用。脂蛋白脂酶(LPL)是血浆甘油三酯(TG)清除的限速酶，可控制血浆TC水平；肝脂酶(HL)由肝细胞合成，分泌入血。催化残粒脂蛋白和高密度脂蛋白(HDL)中的TG和磷脂水解。肝脏与高脂血症有着密切的关系。肝脏是机体脂类代谢的重要器官，在脂类的消化、吸收、合成、分解与运输过程中均具有重要作用。本实验通过制备高脂血症大鼠模型，采用分光比色法及肝脏油红“0”染色，观察针刺治疗后LPL、HL活性的变化及大鼠肝组织汇管区、中央静脉区的肝细胞及红染脂滴的情况，研究针刺丰隆单穴及其配穴对高脂大鼠血清脂蛋白代谢酶及肝脏组织细胞脂肪变性的影响效应及其差别，以探究针灸不同穴位调节血脂的作用机制。 1　材料与方法 1.1　动物与分组健康SD大鼠40只。雄性(♂)，平均体重250g,4月龄。清洁级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。合格号：京动字(1999)036。随机分为4组：空白组、模型组、丰隆单穴组、丰隆配穴组，每组10只。 1.2　高脂血症大鼠模型的制备基础饲料和高脂饲料均由北京科澳协力有限公司提供。高脂饲料组成：85％基础饲料、7.5％猪油、2％胆固醇、0.5％去氧胆酸钠、5％蛋黄粉。空白组每日基础饲料喂养及普通饮水，不作任何处理；其余各组均喂食高脂饲料及普通饮水，造模时间2周。 1.3　针具及仪器毫针：瑞琪尔牌无菌针灸针，直径0.25mm，长13ram。电针：韩氏(HANS)电针仪LH202H型。低温离心机：型号Hermle Zk380，产地德国。超低温冰箱：型号三洋MDF－492，产地日本。分光光度计：型号721，上海第三分析仪器厂。 1.4　操作方法造模第15天开始治疗。丰隆单穴组：取双侧丰隆穴，直刺10ram，接电针仪，频率50Hz，强度lmA，留针20rain。丰隆配穴组：取双侧丰隆穴，直刺10ram，接电针仪，频率50Hz，强度lmA，留针20rain手针直刺关元穴10mm，双侧内关穴5mm，平补平泻，每10rain行针1次，每次行针5s，留针20rain。每周治疗2次，治疗10次。空白组、模型组与治疗组同样抓取，但不针剌。 丰隆穴：位于大鼠小腿骨的中点腓骨后缘相当于丰隆穴肌肉中。关元穴：位于大鼠两后肢根部连线的中点。内关穴：位于大鼠前肢内侧，离腕关节约3mm左右的尺桡骨缝间。参照林文注主编《实验针灸学》大鼠标准穴位图谱定位。 1.5　血清制备　所有大鼠于实验第7周(治疗结束)后取材。取材前1天禁食12h，并称重。用10％水合氯醛(0.35mL／100g)腹腔麻醉，以10mL注射器从腹腔静脉抽取全血，将2mL全血注入离心管，于室温(25℃)静置lh后配平离心。离心机参数：温度4℃、转速3500r／min、时间15mln。用移液枪将离心后的上清液移出，放－70℃冰箱待测。 1.6　肝脏切片制作无菌摘取肝脏，迅速用硫酸纸包好，放入－70℃的冰箱冷冻保存，准备冰冻切片。将冰冻的大鼠肝脏组织放置于冰冻切片机，分别在上、中、下3个部分进行切片，厚度为10－20um。将此血凝片置于载玻片上放人15％福尔马林液中