科学发展灵芝饮片（破壁）.docVIP

灵芝饮片(破壁) LingzhiYinpian（Pobi） 本品为多孔菌科真菌赤芝 Ganoderma ucidum （ Leyss. ex Fr. ）Karst.的干燥子实体经精细粉碎加工制成的饮片（破壁）。 【制法】 取灵芝饮片，粉碎成粗粉，灭菌；将灭菌后的粗粉进行精细粉碎得破壁粉，混匀，分装，即得。 【性状】本品为棕色至棕褐色的粉末， 气微香，味苦涩。 【鉴别】 （1）取本品2g，加乙醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取灵芝对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法 （通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 （365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （2）取本品1g，加水50ml，加热回流1小时，趁热滤过，滤液置蒸发皿中，用少量水分次洗涤容器，合并洗液并入蒸发皿中，置水浴上蒸干，残渣用水5ml溶解，置50ml离心管中，缓缓加入乙醇25ml，不断搅拌，静置1小时，离心（转速为每分钟4000转），取沉淀物，用乙醇10ml洗涤，离心，取沉淀物，烘干，放冷，加4mol/L三氟乙酸溶液2ml，置10ml安瓿瓶或顶空瓶中，封口，混匀，在120℃水解3小时，放冷，水解液转移至50ml烧瓶中，用2ml水洗涤容器，洗涤液并烧瓶中，60℃减压蒸干，用70%乙醇2ml溶解，置离心管中，离心，取上清液作为供试品溶液。另取半乳糖对照品、葡萄糖对照品、甘露糖对照品和木糖对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml各含0.1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-丙酮-水（5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对氨基苯甲酸溶液（取4-氨基苯甲酸0.5g，溶于冰醋酸9ml中，加水10ml和85%磷酸溶液0.5ml，混匀），在105℃加热约10分钟，在紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。其中最强荧光斑点为葡萄糖，甘露糖和半乳糖荧光斑点强度相近，位于葡萄糖斑点上、下两侧，木糖斑点在甘露糖上，荧光斑点强度最弱。 【检查】 应符合以下中药饮片(破壁)指导原则项下的各项规定 水分 不得过9.0%(《中国药典》2015版四部通则0832第二法)。 总灰分 不得过3.2%(《中国药典》2015版四部通则2302)。 外观均匀度 取本品适量，置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在明亮处观察，应色泽均匀，无花纹与色斑。 粒径分布 D90值不得过45.0μm。 未破壁细胞限度 取本品0.1g，加水10ml使混悬，精密量取0.1ml置载玻片上，装片，置显微镜下观察，在10×10倍视野下，大于100μm且完整的细胞的粉末数目不得过10个。 微生物限度 照微生物限度检查法（《中国药典》2015版四部通则1105、1106）检查，应符合规定。 需氧菌总数 不得过104cfu/g。 霉菌及酵母菌数 不得过102cfu/g。 控制菌 不得检出沙门菌（10g）；耐胆盐革兰阴性菌应小于102cfu（1g）。 【浸出物】 照水溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，不得少于3.0%。 【含量测定】 多糖 对照品溶液的制备 取无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含0.12mg的溶液，即得。 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分别置10ml具塞试管中，各加水至2.0ml，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液（精密称取蒽酮0.1g，加硫酸100ml使溶解，摇匀）6ml，立即摇匀，放置15分钟后，立即置冰浴中冷却15分钟，取出，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 供试品溶液的制备 取本品约2g，精密称定，置圆底烧瓶中，加水60ml静置1小时，加热回流小时，趁热滤过，用少量热水洗涤滤器和滤渣，将滤渣及滤纸置烧瓶中，加水60ml，加热回流小时，趁热滤过，合并滤液，置水浴上蒸干，残渣用水5ml溶解，边搅拌边缓慢滴加乙醇75ml，摇匀，在4℃放置12小时，离心，弃去上清液，沉淀物用热水溶解并转移至50ml量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，取溶液适量，离心，精密量取上清液3ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 测定法 精密量取供试品溶液2ml，置10ml具