慢性染铅小鼠脑皮质及海马中PKCγ及ERK表达变化的研究.pdfVIP

取出脑皮质和海马，至．700C冰箱保存。 二、测定指标及方法 1、利用PKC—Y及ERK抗体，Westernblot方法测定慢性染铅小鼠脑皮质中 PKC—y及ERK的异常表达。 2、利用PKC—Y及ERK抗体，Westernblot方法测定慢性染铅小鼠海马中PKC-Y 及ERK的异常表达。 3、标本处理，提取蛋白质，蛋白定量，电泳，电转移，封闭，一抗孵育，二 抗孵育，显色。 三、统计分析处理 用SPSSIO．0软件对实验数据进行方差分析。 结果 1、慢性铅暴露对小鼠脑皮质区组织中ERK蛋白表达的影响 正常对照组中ERK表达水平从7d开始表达水平升高，14d为最高，21d略低于14d 水平，28d又迅速降低，接近ld水平或略低。各染铅组中不同发育时段小鼠脑中ERK 表达在整体上比正常组稍低；各浓度组从7d至14d段变化趋势与正常组基本相似， 而在21d和28d时段中可见明显的不同： 2．4mmol／L组28d的ERK表达接近(略高) 随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低，铅浓度升高至9．6mmol／L时随着铅浓度升高ERK 表达量不再降低相反有所回升。 2、慢性铅暴露对小鼠海马组织中ERK蛋白表达的影响 趋势同上：正常对照组中ERK表达水平从7d开始表达水平升高，14d为最高， 21d略低于14d水平，28d又迅速降低，接近1d水平或略低。各染铅组中不同发育时 段小鼠脑中ERK表达在整体上比正常组稍低；各浓度组从7d至14d段变化趋势与正 常组基本相似，而在21d和28d时段中可见明显的不同：2．4mmol／L组28d的ERK表 达接近(略高)于正常组水平，4．8mmol／L组在21d和28d的ERK表达量最低， 2 ERK表达升高，但此后随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低，铅浓度升高至9．6mol／L 时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。 3、慢性铅暴露对小鼠脑皮质区组织中PKC-Y蛋白表达的影响 不同浓度醋酸铅暴露的不同发育时段小鼠脑皮质中PKCq表达有不同程度 的变化。正常组小鼠脑皮质中PKC．q表达在发育后期逐渐升高，至第14日后迅 速升高，第21日达到高峰，随后又迅速降低，至第35日时达到与出生相近的 水平或更低。铅暴露小鼠脑皮质中PKC．q表达波动与正常组基本相似，但差异 较明显。多数组第21日(21d)为最高峰，随着铅浓度的升高，这些时段的PKCl, 表达逐渐降低，较高铅浓度组酶表达均低于正常组； 而28d-35d时段均低于正 常组。 4、慢性铅暴露对小鼠海马组织中PKC—y蛋白表达的影响 趋势同上：不同浓度醋酸铅暴露的不同发育时段小鼠脑皮质中PKC-7表达 有不同程度的变化。正常组小鼠脑皮质中PKCq表达在发育后期逐渐升高，至 第14日后迅速升高，第21日达到高峰，随后又迅速降低，至第35日时达到与 出生相近的水平或更低。铅暴露小鼠脑皮质中PKC-7表达波动与正常组基本相 似，但差异较明显。多数组第21日(21d)为最高峰，随着铅浓度的升高，这 些时段的PKC．q表达逐渐降低，较高铅浓度组酶表达均低于正常组；而28d．35d 时段均低于正常组。 结论 1、随着铅浓度的升高，PKE-Y表达量降低。 2、铅暴露对发育期小鼠脑中ERK表达水平有明显的影响，尤其是在21d段。 低浓度铅接触引起ERKl／2水平升高，高浓度铅引起ERKl／2水平降低。更高浓度 的铅不能使ERK持续降低，相反略有回升。 3、高浓度铅引起小鼠脑中ERKl／2和PKE—Y表达水平的变化趋势具有一致性。 关键词：细胞外信号调节激酶； 铅暴露； 小鼠；蛋白激酶C； 3 ·ABSTRECT· objective Lcadhas tO itcallbeaccumulatedinnerve neive，and tissue．which