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血小板检查 检验系临检教研室 刘协红 目的要求 掌握 血小板计数的原理、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义。 重点 血小板计数 难点 血小板形态 一、概述 （一）血小板的生成 （二）血小板的生理 血小板的平均寿命为7~14天，具有止血功能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细胞破坏，主要在脾破坏。 脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞留现象即“脾池化”。 （三）血小板检测常用项目 血小板计数 (PLT):手工单项或血液分析仪多项检测 血小板平均体积(MPV) 血小板分布宽度(PDW) 血小板比积(PCT) 二、血小板计数（手工法） （一）原理 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数，计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏RBC, 固定Pt并防止聚集。 （二）试剂 1.草酸铵稀释液 草酸铵1.0g, EDTA-Na2 0.012g，蒸馏水加至100mL。 2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液） 尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤冰箱保存。 （三）器材 光学显微镜 血球计数板 Hb吸管 试管 采血针等 （四）操作 1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL; 2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。室温放置10分钟; 3.充池，静置10~15分钟; 4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共5个中方格内的plt数。 （五）计算 血小板数/L=5个中方格内血小板数（N） ×5×10×20×106/L =N×109/L （六）结果报告 PLT:△△△ ×109/L （七）注意事项 全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防菌，以免计数时误认。 针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。 同时做多项检查时，优先采plt计数之血。 充池前应充分摇匀，充池后需静置10分钟以上待plt全部下沉后再计数。1h内完成。 （八）方法学平价 草酸铵法对RBC破坏力强，使视野清晰，plt形态清楚，是全国临床检验操作规程推荐方法。由于Plt体积小，易粘附、聚集及破坏等，结果不甚理想。 复方尿素法优点是plt胀大易辨认，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，试剂保存时间短。 血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物，故计数误差大。当直方图出现变化时，应用显微镜计数法校准。 流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色标记血小板，根据荧光强度和散射光强度，用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小板计数参考方法。 相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立体感增强，有助于识别血小板，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。 （九）参考值 （100~300）×109/L （十）质量保证 原则是：避免血小板被激活、破坏，避免杂物污染。 1.检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适，储存时间适当； 2.检测中：手工法计数要定期检查稀释液质量，仪器法要质控合格； 3.检测后： （1）用同一份标本制备学血涂片染色精简观察血小板数量、大小、分布情况，并注意有无异常增多的红、白细胞碎片。 （2）用参考方法核对。 （3）同一份标本2次计数误差要10%。 （十一）临床意义 生理变化： ①新生儿婴儿，出生后3个月达成人水平; ②晨间午后，春季冬季，毛细血管静脉; ③运动、饱餐后上升，休息后恢复; ④月经期低，经期后上升; ⑤妊娠中晚期 ，分娩后1~2天 。 病理变化 1.plt减少： ①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等 ②破坏过多：ITP、脾亢、SLE等； ③消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜 ④分布异常：脾肿大、血液被稀释等； ⑤先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征 2.plt增多： ①原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红细胞增多症等； ②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等； ③其他：外科手术后、脾切除等。 2.血小板增高性疾病 ①plt ，而MPV :脾切除，慢粒等； ②plt ，而MPV ：严重感染。 3.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高 五、血小板形态检查 形态检查内容 血小板大小 有无巨大血小板或小型血小板 形态 胞质的颜色，颗粒有无、分布、 粗细、空泡 PLT分布 (一)正常形态 1.5~3μm，呈圆形、椭圆形、逗点形或不规则形； 胞质呈淡蓝或粉红，中心有若干细小紫红色颗粒，无细胞核 血片上3~5成群。 (二