hsnha形成二聚体行使转盐功能-第三军医大学学报.docVIP

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2017-08-31 发布于天津
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破骨细胞钠氢转运蛋白关键位点研究黄晓斌仲蕾蕾重庆重庆大学农学及生命科学研究院摘要目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白对其关键氨基酸保守位点进行突变分析鉴定其作为盐离子载体转运的功能方法采用突变试剂盒依次把此蛋白的和个位点的天冬氨酸中个氨基酸突变成半胱氨酸得到个不同位点突变的定点突变体构建酵母双基因表达载体通过电穿孔的方式转入到酵母菌株中印迹检测个定点突变基因在酵母菌株的表达通过选择压力显示个突变体在高盐环境中的相互作用观察菌株的抗盐生长表型结果成功获得适合转化酵母的多个

破骨细胞钠氢转运蛋白关键位点研究黄晓斌，仲蕾蕾（400030重庆，重庆大学农学及生命科学研究院） [摘要]目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2，对其关键氨基酸保守位点进行突变分析，鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能。方法采用突变试剂盒依次把此蛋白的D278和D279 2个位点的天冬氨酸中1个氨基酸突变成半胱氨酸，得到2个不同位点突变的定点突变体；构建酵母双基因表达载体，通过电穿孔的方式转入到酵母菌株中；Western印迹检测2个定点突变基因在酵母菌株的表达；通过NaCl选择压力显示2个突变体在高盐环境中的相互作用，观察菌株的抗盐