糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌糖原沉积关系.docVIP

糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌糖原沉积关系基金项目：广西2010年研究生教育创新计划资助项目（项目编码：2010105981002 M 206） 作者单位：530021 广西医科大学 通讯作者：朱立光 【摘要】 目的 使用超声心动图评价糖尿病心肌病大鼠心功能的变化，探讨糖尿病心肌病大鼠心功能与心肌糖原沉积的关系。方法 24只8周龄雄性SD大鼠随机分成4周对照组（n6）、4周糖尿病组（n6）、12周对照组（n6）和12周糖尿病组（n6），腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）建立糖尿病模型（55 mg/kg）。采用超声心动图检测大鼠心功能，根据大鼠心肌糖原染色计算糖原容积分数。结果 4周时与对照组相比，糖尿病组LVEDD指数和LVESD指数明显高于同期对照组,左心室短轴缩短率减少（P＜0.05），心肌糖原沉积明显（P＜0.01）；12周时与对照组相比，糖尿病组LVEDD指数和LVESD指数显著高于同期对照组，左心室射血分数明显降低（P＜0.01），左心室短轴缩短率明显减少（P＜0.05），心肌糖原沉积显著（P＜0.01）。相关分析显示，左心室射血分数与心肌糖原沉积呈明显负相关（r1-0.803，P＜0.01），左心室短轴缩短率与心肌糖原沉积呈显著负相关（r2-0.565，P＜0.01）。结论 STZ腹腔注射后12周成功制作糖尿病心肌病大鼠模型，糖尿病心肌病大鼠的心功能变化和心肌糖原沉积密切相关。 【关键词】 糖尿病心肌病； 心功能； 糖原； 大鼠 糖尿病是一种严重危害人类健康的常见疾病。全世界糖尿病患者人数已经超过2亿人，而在我国糖尿病患者也超过了7000万人［1］。1972年Rubler等［2］在糖尿病患者中，排除冠心病、高血压病、瓣膜病和原发性心肌病后，发现有4例患者出现心脏扩大和充血性心力衰竭，推测可能存在一种继发于糖尿病的心肌病。糖尿病心肌病中，心肌糖原沉积过多影响心脏功能。本研究借助超声心动图评价心功能的优势，探讨心功能和心肌中糖原沉积的关系。 1 材料与方法 1.1 实验动物 实验动物采用8周大小雄性SD大鼠，体重约在180～200 g之间，属于无特定病原体（SPF）级动物，购自广西医科大学实验动物中心（合格证编号：SCXK 桂2009-0002）。 1.2 方法 1.2.1 糖尿病大鼠模型建立 24只雄性SD大鼠随机分为4周对照组（n6）、4周糖尿病组（n6）、12周对照组（n6）和12周糖尿病组（n6）。糖尿病组腹腔内注射链脲佐菌素（美国Sigama公司）溶液55 mg/kg，柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解，pH 4.3。对照组注射适量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。7 d后用血糖仪检测鼠尾血血糖，血糖稳定后，空腹血糖≥11.1 mmol/L或非空腹血糖≥16.7 mmol/L纳入糖尿病组。 1.2.2 心功能检测 4周和12周后大鼠用心脏实时三维超声诊断仪（荷兰皇家飞利浦公司HDI5000型）经胸超声心动图盲法检测左心室舒张末内径（left ventricular end diastolic dimension，LVEDD）和收缩末内径（left ventricular end systolic dimension, LVESD）、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction, LVEF）、左心室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening, LVFS）,测量取3个以上连续的心动周期，然后取平均值。用体表面积校正LVEDD和LVESD，LVEDD指数LVEDD/大鼠体表面积，LVESD指数LVESD/大鼠体表面积［3］。 1.2.3 心肌糖原染色（PAS染色）分析 大鼠心肌石蜡切片脱蜡至水，PAS染色。细胞核染成蓝色，糖原及其他PAS反应物呈紫红色。每个标本随机取5个视野。应用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测定心肌糖原容积分数（心肌糖原容积分数视野中糖原面积/视野心肌总面积）。 1.3 统计学处理 所得数据采用SPSS 13.0统计软件进行分析统计，各计量资料均以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较用t检验；相关分析采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 实验大鼠成模情况 对照组和糖尿病组共有24只大鼠达到模型标准，不达标糖尿病大鼠3只，饲养过程中死亡9只（糖尿病大鼠9只），糖尿病组可能死于感染或酮症酸中毒，成模率为66.7%（24/36）。 2.2 心功能测定 4周糖尿病组LVEDD指数和LVESD指数明显高于同期对照组，而左心室短轴缩短率低于同期对照组，差异有统计学意义；