双光子显微镜检测活体小鼠脑内微循环技术的建立.pdfVIP

中国应用生理学杂志，2015 ， 31(3) 245 双光子显微镜检测活体小鼠脑内微循环技术的建立铃 刘双双l ，黄继云2 ，肖桂凤1 ，尹 伟l ，林赵肖楠l ，卢应梅3 (1.浙江大学医学院公共技术成像平台， 2. 浙江大学毒理与生化药学研究所，杭州 31∞58; 3. 浙江大学城市学院医学院，杭州 31∞15) 【摘要] 目的:利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术，观察活体小鼠脑内血管的三维立体分布，建立 测量单根毛细血管血流速度的新方法。方法:麻醉小鼠，制作活体小鼠颅骨开窗样本，尾静脉注射血浆标记物 Texas-Red dextJ田，利用双光子显微镜 z 序列扫描检测脑内微循环系统的三维分布;利用线扫描测量毛细血管的血流 速度。结果:通过双光子显微镜可以探测到脑内 5∞μm 处的血管分布和走向，图像清晰且信噪比高;通过计算单 位时间内红细胞的运动距离测得毛细血管(直径运6 阳n) 的血流速度为(0.59 :1: 0.12) nun/s。结论:利用双光子显 微镜观察脑内微循环系统技术平台初步建立，为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。 [关键词]双光子显微镜;大脑皮层;微循环;血流速度 [中图分类号]Q334 [文献标识码] A [文章编号] l000-6834(却15)03-245-04 [DOI] 10. 13459/j. 咄.c]ap. 却15.03.014 In vivo imaging of blood f10w using two-photon laser scanning f1uorescent microscopy 2 口U Shuang-shuang , HUANG Ji-严m ， XIAO Gui-feng , YIN Wei , LIN Zhao-xiao-nan , LU Ying-me? (1.由e lmaging Center , co陀 Facilities of Zhejiang UniveISity Sch∞，1 of Medicine , 2. Institute of PI回皿国col吨;y， Toxicol匈牙 and Bi配hemical phann配eub臼 of Zhejiang UniveISity , H皿伊Eω31α)58: 3. zh句iang UniveISity City College of Medicine , Han俘hou 31∞15 ， α臼na) [A即回ACf]创jecdve: To 伽m 由e 由协dimensi叫distribution of ve酣ls ， andω 创ahlish a new me削for measurement of bl叫 flow velocity in uùce cerebral cortex using tw• photon laser scanning uùcn:陷copy and fluorescence probe laheling tecru咀que. Met扭曲:四e mouse was made cranial window s山-gery and injected Texas-Red through tail vein after an皑白etized. 币le thre• dimensional in国♂ng of vessel was obtained 出rough z-stack scanning , and blood flow velocity was quan凶ed through line scannin吕. Results: We could detect vascular distri- bution for more 由皿 5∞