基于鹅T细胞表面CD4分子胞外区的双抗体夹心ELISA检测方法的建立.pdfVIP

第 38 卷第9 期 Vo l. 38 ,No.9 中国预防兽医学报 2016 年 9 月 Chinese Joumal of Preventive Veterinary Medicine Sep. 2016 doi: 10.3969/j .issn.1008-0425.2016.09.12 基于鹅T 细胞表面 CD4 分子胞外区的双抗体夹心 ELISA 检测方法的建立 张伟IT ，程蓓蓓 lf ，陈 舜 l 川，江铭书 1 ，口，程安春 1 ， 2， 3 (1四川农业大学动物医学院/预防兽医研究所，四川成都611130; 2. 四川农业大学动物医学院/禽病防治与研究中心， 四川成都611130; 3. 四川农业大学动物医学院/动物疾病与人类健康研究四川省重点实验室，四川成都 611130) 摘 要:为建立鹅 CD4 分子(goCD4)双抗体夹心 ELISA(DAS-ELISA)检测方法，本研究以鼠抗 goCD4-exc 多 克隆抗体为包被抗体，兔抗 goCD4-exc 多克隆抗体为检测j 抗体，确立判定标准，优化反应条件，建立了 goCD4 DAS-ELISA 的检测方法。试验结果显示该方法最低检出量达 5 pg!mL， 具有较好的灵敏度。批内批间变异系数均 低于 2%，具有较好的重复性。将建立的双抗体 ELISA 方法初步应用于检测小鹅瘟病毒(GPV)感染的鸪脾羊核细 胞中 CD4 分子表达水平变化情况，结果显示 GPV 感染鹅脾羊核细胞中 goCD4 分子表达水平极其显著高于未感染 纽。本研究建立的检测 goCD4 的 DAS-ELISA 方法有利于进一步研究禽类细胞免疫水平变化，并对实际生产中禽 病检测及防控提供技术参考。 关键词:鹅j CD4 分子;多克隆抗体;双抗体夹心 ELISA 中图分类号: S852.65 文献标识码:A 文章编号: 1008-0589(2016)09-0729-05 Development and optimization of a double antibody sandwich ELlSA based on the extracellular region of goose T cell surface CD4 molecule 1 ZHANG WeP t, CHENG Bei-bei t, CHEN Shun旷1 ， 2气， 33 (υ1. Institute of Preventive Veterinary Medicine , Sichuan Agricultural Universi纱， Chengdu 611130 , China; 2. Avian Disease Research Center , College of Veterinary Medicine , Sichuan Agricultural University , Chengdu 611130 , China; 3. Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province , Sichuan Agricultural University , Chengdu 611130 , China) Abstract: In this paper , we aimed at developing and optimizing a double antibody sandwich