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勉扬铄靠2012，38(6)：90—94 PlantProtection
杨家强1， 王相晶1， 郭兆将2， 朱 勋2， 吴青君2+
谢 文2， 王少丽2， 徐宝云2， 张友军2
(1．东北农业大学生命科学学院，哈尔滨150030；2．中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081)
佳反应体系。通过梯度退火试验，确定不同引物的最适退火温度。优化得到的反应体系(20“I。)为：Mf+浓度
1．5mmol／I。、TaqDNA聚合酶2．5U、dNTPs浓度0．2mmol／I．、引物浓度1．25 ng。反应
t,mol／I。、模板DNA量20
min；94℃变性45．0
程序为：94℃预变性5．0 S，40～61℃(不同引物退火温度各异)退火1．0min，72℃延伸
1．5rain，40个循环；72℃延伸10．0
DNA谱带。
关键词 小菜蛾； ISSR；正交设计； 反应体系
S433．4 A DOI： 0529—1542．2012．06．019
中图分类号： 文献标识码： 10．3969／j．issrL
Establishmentand ofISSR-PCRreaction with
optimization system
forPlutella tella
orthogonaldesign xylos
Xun2，wu
Yang Zhaojiange，Zhu
Jiaqian91，WangXiangjin91，Guo Qingjun2，
Xie Shaoli2，Xu
Wen2，Wang Baoyun2， Youjun2
Zhang
Sciences，Northeast 150030，China；
(1．CollegeofLife AgricuhurafUniversity，Harbin
2．Institute and
Flowers，Chinese 100081，China)
ofVegetables AcademyofAgriculturalSciences，Beijing
To
Abstractestablishand ISSR—PCRreactionforPlutella onthe DNA
optimize system xylostella，basedgenomic
of factors ISSR were withthe
P．xylostella，theinfluencingsystemexplored L16(45)orthogonaldesign．Theopti-
mal forISSR-PCRwas
reaction PCR．The conditionsforIS-
annealingte
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