P-gp、MRP、LRP、GST-π及TOPOⅡα的表达与人NSCLC耐药相关性的临床研究.pdfVIP

目 录 一、摘要……………………………………………………………………1 (一)中文摘要…………………………………………………………1 (二)英文摘要…………………………………………………………3 二、正文……………………………………………………………………5 (一)月U舌……”……一”””””一”””””一”””””一…”……”一”一·5(一)前言………………………………………………………………5 (二)材料与方法………………………………………………………6 (三)结果……………………………………………………………15 (四)讨论……………………………………………………………2l (五)结论……………………………………………………………24 (六)参考文献………………………………………………………25 三、综述………………………………·………………………………“27 (一)综述…………………………………………………………27 (二)参考文献………………………………………………………33 四、致谢·····························································”············35 IIQ P—gP、MRP、LRP、GST一兀禾口TOPO 的表达与人NSCLC耐药相关性的临床研究 硕士生姓名： 王媛 指导教师： 王琪教授 指导小组： 王琪教授 专业名称： 内科学 摘要 目的：人非小细胞肺癌(NSCLC)的耐药机制非常复杂，涉及多种因素，其 中耐药相关蛋白的过度表达是重要原因。目前研究较多的耐药相关蛋白主要有： x(GST一兀)，拓扑异构酶1I(Top0II)，它们在NSCLC耐药中发挥了重要的作用。因此 本研究以人肺癌组织为研究对象，应用原代细胞培养、RT．PCR、Westernblot和免 疫组化等方法，检测肺癌组织中P．gP等五种耐药相关蛋白的表达水平；同时，根据 不同病理类型的肺癌组织在化疗药物顺铂、吉西他滨和紫杉醇作用下的IC50值，分 析P．gp等耐药蛋白与肺癌耐药的相关性，进一步探讨这些耐药相关蛋白在肺癌耐药 中的作用。 方法：收集2010年10月．201 1年6月大连医科大学附属第一医院胸外科手术 切除的16例的新鲜肺癌组织进行细胞原代培养，采用四噻唑蓝 醇三种化疗药物的体外敏感程度，计算细胞生存率和耐药率；采用RT-PCR、 Western 述肺癌组织及其对应的癌旁肺组织中核酸及蛋白的表达水平；采用Pearson相关分 析方法分析三种化疗药物作用下的原代肺癌细胞生存率与肺癌组织中P．gP、MRP、 相关性。 结果：1．P．gP等五种耐药蛋白在不同病理类型及分期的肺癌组织中均有表达， 但表达水平明显不同。例如腺癌中LRP、P．gP的表达明显高于鳞癌，而鳞癌中GST-x 和TopolIa的表达明显高于腺癌。GST一兀在高分化肺癌中的表达高于低分化肺癌， 低分化肺癌中LRP的表达明显高于高分化肺癌；但P．gP等五种耐药蛋白在癌旁组 织中低表达或不表达。2．不同病理类型及分期的原代肺癌细胞对顺铂、吉西他滨 和紫杉醇三种化疗药物的敏感性不同。如腺癌细胞对三种药物的敏感性均高于鳞 癌，III期肺癌细胞对药物的敏感性均高于I、II期。3．P．gP等五种耐药蛋白的表 达与原代肺癌细胞对顺铂等三种化疗药物的耐药的相关性不同。P．gP、LRP与原 代肺癌细胞对顺铂的耐药呈正相关，TopolIa与原代肺癌细胞对吉西他滨的耐药呈 正相关；而GST-兀、MRP与原代肺癌细胞对紫杉醇的耐药呈负相关。 分期及不同分化程度的肺癌中表达水平不同，其表达与肺癌细胞对顺铂、吉西他 滨和紫杉醇的化疗敏感性的差异有关。临床上可依据耐药相关蛋白的表达，选择 敏感的化疗药物。同时检测多个耐药蛋白不仅有助于揭示肺癌耐药的本质，也有 助于正确制定化疗方案，增强化疗疗效，改善预后。 关键词：